牙髓细胞感染P.g的胞内类型识别受体及信号转导初步探讨

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牙髓组织所在的特殊解剖结构表明探讨牙髓根尖周病的病因和防治需要考察细菌对牙髓组织的致炎能力。牙龈卟啉单胞菌是牙髓病根尖周病的可疑致病菌。牙髓成纤维细胞作为牙髓组织中最广泛的非专职抗原呈递细胞能够识别细菌和启动牙髓组织的免疫反应。因此探讨牙髓成纤维细胞受到牙龈卟啉单胞菌攻击后生物学性状的改变能够给处理早期牙髓炎症提供帮助目的:探讨牙龈卟啉单胞菌活菌胞内攻击牙髓成纤维细胞后,牙髓成纤维细胞的细胞活力和胞内类型识别受体以及信号转导分子基因mRNA表达水平的改变。方法:建立牙龈卟啉单胞菌活菌攻击牙髓成纤维细胞的体外模型。采用建立的模型使用MTT法研究牙龈卟啉单胞菌不同浓度的活菌和不同攻击时间对于牙髓成纤维细胞活力的影响。采用realtime-PCR的方法观察不同浓度活菌攻击后的牙髓成纤维细胞在攻击后胞内NOD(Nucleotide-bindingoligomerization domain)1、NOD2和RIP2(receptor interact protein 2)mRNA转录水平的改变。结果:当MOI100和MOI200时牙龈卟啉单胞菌活菌能进入牙髓成纤维细胞内部并且细胞破碎后能在BHI血琼脂平板培养基上再次培养出牙龈卟啉单胞菌。MOI100和MOI200条件下牙龈卟啉单胞菌活菌攻击后牙髓成纤维细胞能保留超过60%的活力。牙髓成纤维细胞能表达胞内类型识别受体NOD1、NOD2和信号转导分子RIP2。牙髓成纤维细胞受到牙龈卟啉单胞菌活菌攻击以后2小时NOD1、NOD2和RIP2的mRNA表达水平最高,以后逐渐下降,但到24小时以后仍然和对照组有差异。牙髓成纤维细胞受到P.g活菌攻击以后NOD1、NOD2和RIP2转录水平的调节和攻击的细菌的量没有明显的比例关系。结论:成功地建立了牙龈卟啉单胞菌活菌攻击进入牙髓成纤维细胞的体外模型。牙龈卟啉单胞菌活菌对牙髓成纤维细胞具有浓度依赖性的细胞毒性,能减弱牙髓成纤维细胞的细胞活力。牙髓成纤维细胞能表达胞内类型识别受体NOD1、NOD2和信号转导分子RIP2,牙龈卟啉单胞菌进入胞内后这些分子表达水平显著上调,表明牙髓成纤维细胞能识别进入胞内的细菌及其代谢产物,并通过RIP2进行信号转导。牙髓成纤维细胞受到牙龈卟啉单胞菌攻击以后NOD1、NOD2和RIP2的转录水平随攻击后的时间改变。牙髓成纤维细胞受到P.g攻击以后NOD1、NOD2和RIP2转录水平的调节和攻击的细菌的量没有明显的比例关系。
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