没药中治疗原发性痛经的效应物质基础研究

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本论文对没药治疗原发性痛经的效应物质进行研究。第一章较为系统地总结了常用树脂类药材形成机理及功效与物质基础相关性研究进展、没药的化学成分及其生物活性研究进展、原发性痛经研究进展。第二章为没药中治疗原发性痛经效应部位的筛选。采用小鼠原发性痛经模型、原发性痛经模型小鼠子宫病理切片、镇痛实验、抗炎实验、血小板聚集实验等对没药不同提取物治疗原发性痛经的效应部位进行筛选,主要结论如下:1、小鼠原发性痛经模型研究结果表明:提取物G、F可非常显著(P<0.01)地降低痛经小鼠扭体次数,并且可升高痛经小鼠子宫组织中NO水平,同时降低子宫组织中钙离子水平,与模型对照组比较具有非常显著性差异(p<0.01)。挥发油部位亦可非常显著(P<0.01)地降低痛经小鼠扭体次数。2、原发性痛经模型小鼠子宫的病理切片观察结果表明:没药提取物G能够明显改善痛经引起的小鼠子宫病理变化,无明显水肿、炎细胞无明显增多。与模型组比较有显著性差异(p<0.05)。3、镇痛实验结果表明:提取物F、G对醋酸刺激引起的小鼠疼痛反应有显著镇痛作用(p<0.05)。挥发油对醋酸刺激引起的小鼠疼痛反应有非常显著镇痛作用(p<0.01)。但提取物F、G以及挥发油对小鼠热板痛阈无效,说明其对外周性疼痛有较强的镇痛作用,但对中枢性疼痛的作用不明显。4、抗炎实验结果表明:提取物A、F、G,挥发油组可显著(p<0.05)抑制皮下注射甲醛引起的水肿,并且可非常显著(p<0.01)地降低炎症组织中的PGE2含量。5、体外ADP诱导的血小板聚集实验结果表明:没药提取物A、F、G、H对ADP诱导的血小板聚集均有明显的抑制作用。IC50分别为:56.80、28.68、12.40、25.00(mg/mL)。挥发油无抗血小板聚集活性。6、体外对妇科肿瘤细胞活性影响的实验结果表明:没药提取物B和提取物F对4种癌细胞均有显著的抑制作用。提取物B对4种肿瘤细胞的抑制作用强弱依次为:shikawa(IC50:26.634ug/mL)、A2780(IC50:26.908 ug/mL)、SiHa(IC50:32.204ug/mL)、SK-OV-3(IC50:38.716ug/mL);提取物F对4种肿瘤细胞的抑制作用强弱依次为:A2780(IC50:15.809ug/mL)、shikawa(IC50:20.733ug/mL)、SK-OV-3(IC50:22.076ug/mL)、SiHa(IC50:57.830ug/mL)。没药对人卵巢癌细胞A2780、人卵巢癌细胞SK-OV-3、人宫颈癌细胞SiHa、人子宫内膜癌细胞shikawa的抑制活性与倍半萜类成分密切相关。第三章为没药化学成分研究。从没药提取物G中分离得到两个化合物:2-methoxy-8,12-epoxygermacra-1(10),7,11-trien-6-one(1);2-Methoxy-5-acetoxy-fruranogermacr-1(10)-en-6-one(2),从没药提取物H中分离得到4个化合物:Mansumbinone(3);myrrhone(4);二十二烷酸(5);β-谷甾醇(6)。第四章为没药活性部位的化学成分分析。通过GC-MS分析了没药挥发油的化学成分,通过UPLC-MS/MS分析了没药中非挥发油的化学成分。结论如下:1、没药挥发油的GC-MS分析结果表明:没药挥发油主要成分为倍半萜类化合物,鉴定出41种化学成分,占挥发油总量的57.22%,其中倍半萜curzerene报道具有显著的镇痛效果,没药挥发油镇痛活性与倍半萜类成分密切相关。2、没药效应部位中化学成分的UPLC-MS/MS分析结果表明:活性部位F、G中化学成分主要为倍半萜、二萜、二萜酸等类型化合物,提示可能为萜类化合物对痛经产生治疗效应。
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