【摘 要】
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根据已发表的鸡痘病毒(fowlpox virus,FPV)4 b核心蛋白基因的核苷酸序列设计合成了(P3,P5)1对引物,通过对影响PCR扩增条件的优化,在不同的退火温度下,直接以病毒液为模板扩增
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,华南农业大学动物科学学院,广东大华农动物保健品股份有限公司
【基金项目】
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广东大华农动物保健品股份有限公司禽痘疫苗研制项目;
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根据已发表的鸡痘病毒(fowlpox virus,FPV)4 b核心蛋白基因的核苷酸序列设计合成了(P3,P5)1对引物,通过对影响PCR扩增条件的优化,在不同的退火温度下,直接以病毒液为模板扩增出预期的1 107bp的片段.特异性检测表明,两对引物对FPV102株、FPV282E4(北京)、大华农鸡痘疫苗毒株、重组鸡痘疫苗病毒及临床病料均能扩增出相应的特异性片段,而用鸡马立克氏病毒、传染性支气管炎病毒,鸽痘病毒及鸡胚成纤维细胞制备的模板进行PCR扩增均为阴性.敏感性检测表明,引物能检测0.195 ng/μL的模板量.用此方法检测50份临床样品.其中的阳性率为92%,用琼脂扩散试验方法检测的阳性率为70%.以上结果表明,该方法可以用于FPV临床样品的检测.
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