【摘 要】
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探讨大肠杆菌细胞质氧化还原环境对重组蛋白溶解性的影响.选择含有1对二硫键的牛碱性成纤维细胞生长因子(BbFGF)作为简单蛋白的模式分子,选择含有2对二硫键的人抗HBsAg单链抗
【机 构】
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暨南大学生物医药研究开发基地,解放军458医院全军传染病中心
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，广东省广州市科技局科技攻关项目
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探讨大肠杆菌细胞质氧化还原环境对重组蛋白溶解性的影响.选择含有1对二硫键的牛碱性成纤维细胞生长因子(BbFGF)作为简单蛋白的模式分子,选择含有2对二硫键的人抗HBsAg单链抗体(HBscFv)作为复杂蛋白的模式分子,分别构建表达质粒并转化普通宿主菌和还原酶缺陷型宿主菌E. coli Origami(DE3),比较表达产物的溶解性和纯化产物的活性.结果发现,BbFGF在普通宿主菌中大部分形成包涵体,在Origami(DE3)中为可溶性表达,但表达量降低.两种工程菌的表达产物经离子交换和肝素亲和层析两步纯化
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