【摘 要】
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N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺对辣根过氧化物酶(HRP)进行化学修饰,在酶分子表面接上不饱和双键,以聚乙二醇400二丙烯酸酯(单体A)、聚乙二醇400二甲基丙烯酸酯(单体B)、聚乙二醇200
【机 构】
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浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江大学化学系
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(20276067)
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N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺对辣根过氧化物酶(HRP)进行化学修饰,在酶分子表面接上不饱和双键,以聚乙二醇400二丙烯酸酯(单体A)、聚乙二醇400二甲基丙烯酸酯(单体B)、聚乙二醇200二丙烯酸酯(单体C)、聚乙二醇200二甲基丙烯酸酯(单体D)4种单体中的一种和丙烯酰胺为聚合原料,在引发剂作用下进行自由基原位聚合,使酶分子的表面形成多点连接的网状薄壳结构,获得4种新型包埋的辣根过氧化物酶.研究结果表明,聚乙二醇200(400)二丙烯酸酯包埋酶的活性和稳定性较高.在pH为3.0、11.0和温度为70℃的条件下,C-HRP的相对活性达到47.9%、39.7%、76.5%,重复使用5次后,C-HRP保留了62.1%的初始活性.在变性剂SDS和脲中浸泡30d后,4种包埋酶的活性可以保持初始活性的36%以上,说明采用该新型包埋方法可以获得较高的酶活性和稳定性.
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