【摘 要】
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目的为实现对5种经典肠毒素的准确、快速鉴定及分型,本研究基于ELISA和芯片技术,建立金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阵列ELISA(Array-ELISA)检测方法。方法通过原核表达、亲和纯化
【机 构】
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军事医学研究院微生物流行病研究所;
【基金项目】
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国家科技重大专项课题(2018ZX10711001-003,AWS15J006);病原微生物生物安全国家重点实验室自主基金(SKLPBS1816)
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目的为实现对5种经典肠毒素的准确、快速鉴定及分型,本研究基于ELISA和芯片技术,建立金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阵列ELISA(Array-ELISA)检测方法。方法通过原核表达、亲和纯化制备SE蛋白,利用杂交瘤腹腔注射制备腹水,纯化SE单克隆抗体,通过ELISA对抗体的灵敏度、特异性进行评价,点制Array-ELISA阵列,评价Array-ELISA对SE检测的灵敏度和特异性。结果采用Array-ELISA,在PBS中SE的检测限除葡萄球菌肠毒素C(SEC)为10 ng/mL外,其余均为0.0001 ng/mL,液态牛奶中SE的检测限为(0.001～10)ng/mL。在PBS和牛奶中SE检测的特异性均为100%,各型SE之间无交叉反应。同时显示与肉毒毒素也无交叉反应。结论成功建立Array-ELISA检测方法,能够灵敏、准确鉴定同一份样本中5种经典SE。
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