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目的
体外探讨缺血启动新生大鼠未成熟室管膜下区(SVZ)和脑白质内源性修复机制。
方法体外培养5日龄内SD新生大鼠的SVZ和脑室周围白质细胞,各分为正常对照组和氧气-葡萄糖剥夺(OGD)组,利用免疫荧光双标技术检测新生祖细胞的增殖分化情况,利用Hoechst33342/碘化丙啶双染技术和流式细胞术检测新生细胞成活情况。
结果OGD组SVZ和脑白质在OGD后24 h、48 h、72 h、7 d及14 d均出现明显的凋亡和坏死细胞,各时段新生细胞的凋亡率均显著高于同时段对照组(P均<0.01)。荧光显微镜观察显示,与正常对照组比较,OGD组SVZ和脑白质新生NG2+祖细胞和O4+少突胶质细胞(OL)前体的细胞数量在OGD后72 h内均明显增加(P均<0.05,0.01),CNPase+未成熟OL和MBP+成熟OL在OGD后7 d和14 d则较同时段正常对照组明显减少(P均<0.05,0.01)。
结论缺血可诱导SVZ和脑白质神经祖细胞激活和明显增殖,并沿OL系分化,但最终仅有极少量新生OL前体能分化为未成熟和成熟OL;同时,缺血导致OGD组新生细胞出现明显凋亡和坏死。