内毒素脂多糖(LPS)对人牙周膜成纤维细胞TNF—α、IL—6

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  [摘要] 目的 研究内毒素脂多糖(LPS)对人牙周膜成纤维细胞TNF-α、IL-6表达的影响。 方法 培养HPLFs细胞,将细胞分为LPS 刺激0 mg/L(对照组)、1 mg/L(实验Ⅰ组)、10 mg/L(实验Ⅱ组),应用ELISA法检测IL-6、TNF-α因子的表达情况。 结果 LPS 刺激6 h时,HPLFs中TNF-α、IL-6的表达量显示:Ⅰ、Ⅱ组显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。LPS 刺激12 h时,HPLFs中TNF-α、IL-6的表达量显示:Ⅰ、Ⅱ组也显著高于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。HPLFs细胞中TNF-α、IL-6的表达随LPS刺激浓度呈剂量依赖性;且对照组、及Ⅰ组、Ⅱ组经LPS 刺激12 h的TNF-α、IL-6表达均显著高于刺激6 h,差异有高度统计学意义(P<0.01)。 结论 内毒素脂多糖(LPS)能够刺激人牙周膜成纤维细胞分泌TNF-α、IL-6炎症因子。
  [关键词] 内毒素脂多糖(LPS);人牙周膜成纤维细胞;TNF-α;IL-6
  [中图分类号] R780.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2016)10-0001-03
  [Abstract] Objective To study the effect of lipopolysaccharide(LPS) on the expression of TNF-α and IL-6 in human periodontal fibroblast cells. Methods HPLFs cells were cultured. The cells were divided into LPS stimulated 0 mg/L (control group), 1 mg/L(experimental group Ⅰ) and 10 mg/L(experimental group Ⅱ). The expression of IL-6 and TNF-α was detected by ELISA method. Results The expression of LPS, TNF-α and IL-6 in HPLFs was significantly higher than that in control group at 6 hours, the expression of group Ⅱ and group Ⅰ was significantly higher than that in control group, the difference was statistically significant(P<0.05). The expression of I and TNF-in HPLFs was significantly higher than that in control group, the difference was statistically significant in the expression group Ⅱ and IL-6 in LPS in 12 hours(P<0.01). The expression of TNF-α and IL-6 in HPLFs cells with LPS stimulus concentration in a dose-dependent manner; and the control group, and group Ⅰ, group Ⅱ by LPS stimulation the expressions of 12 hours of TNF-α and IL-6 were significantly higher than those in the 6 h of stimulation, the difference was statistically significant(P<0.01). Conclusion Lipopolysaccharide(LPS) can stimulate the secretion of TNF-α and IL-6 inflammatory factors in human periodontal fibroblast cells.
  [Key words] Lipopolysaccharide lipopolysaccharide (LPS); Human periodontal fibroblast; TNF-α; IL-6
  革蘭阴性菌的内毒素脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是一种公认的重要的牙周病致病因子,研究发现,其具有调节细胞的生长、合成代谢,并刺激巨噬细胞、单核细胞、成纤维细胞等分泌IL-6、TNF-α等多种炎症介质的作用[1]。牙周膜成纤维细胞(human periodontal fibroblast,HPLFs)是牙周组织中数量最多的细胞,牙周膜成纤维细胞(HPLFs)在牙周组织健康中发挥着重要作用[2]。本实验旨在探讨经脂多糖刺激后的牙周膜成纤维细胞炎症因子IL-6、TNF-α表达情况,现报道如下。
  1 材料与方法
  1.1 一般材料
  DMEM培养液(Gibco,USA);牛血清(Gibco,USA);LPS从细菌Salmonella minnesota Re595中提取并保存。鼠SP免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒;CO2培养箱(Yamato,Japan);超净工作台(苏州安泰空气技术公司);倒置显微镜(广西梧洲市光学仪器厂);酶标分析仪(Thermo corporation,USA);多功能真彩色细胞图像分析管理系统(Media Cybernetics,USA)。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA 试剂盒(R
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