结核杆菌19ku脂蛋白的表达与纯化

来源 :江汉大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:caiql
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目的:通过基因工程技术获得重组结核分枝杆菌19ku蛋白。方法:应用PCR技术扩增卡介苗的19ku蛋白DNA序列;以质粒pET28a为表达载体,构建19ku重组质粒,然后转化大肠埃希菌BL21(DE3);在异丙基硫代-β—D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,分别对不同诱导时间的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE),凝胶经考马斯亮蓝染色检测蛋白。通过镍柱纯化后获得目的蛋白。结果:重组质粒pET28a—p19测序表明与报道的序列相同。它在大肠埃希菌BL21(DE3)细胞内以可溶性形式表
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