标本扩增效率的计算及其对HBV DNA定量结果的影响

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目的建立分析标本扩增效率的方法,分析其对HBV DNA定量结果的影响。方法应用分析软件提供的样点拟合法及对数荧光-循环数坐标图,计算得到Ct,HBV DNA拷贝数以及每一标本的扩增效率。分析40个HBVDNA拷贝数在104~108/ml的标本的扩增效率,并用得到的标本实际扩增效率加以校正。结果4个标准的扩增效率分别为0.80,0.80,0.84和0.85。标本的扩增效率在0.59~0.85之间,其中30份(75%)在0.7~0.85之间,8份(20%)在0.65~0.70之间,其余2份在0.65以下。部分校正后的HBV DNA定量结果比校正前高一个数量级。结论标本与标准的扩增效率不一定相同,标本扩增效率的降低导致标准曲线定量结果偏低,有必要用标本的实际扩增效率对结果进行校正。
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