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为建立铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)外毒素A(ExotoxinA,ETA)的原核表达方法,采用PCR技术扩eta基因,将其插入pET-28a载体构建重组质粒pET-28a—eta,并对重组质粒进行双酶切、PCR及测序鉴定。转入BL21(DE3)中诱导表达,检测目的蛋白大小及反应原性,然后进行表达条件的优化及其表达形式检测。结果表明,所扩增eta基因大小为1917bp,与GeneBank参比序列一致性在98.70%;蛋白分析表明,rETA大小为74KDa,具有和天然毒素相似的反应