【摘 要】
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探讨显微切割过程中有效保持RNA完整性的组织固定方法,建立一种简易的手工显微切割法.应用自制“T形板”辅助冰冻切片,100%无水乙醇一次性脱水固定,“排除切割法”获取目的细
【机 构】
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汕头大学医学院,分子生物学中心,肿瘤医院胸外科
【基金项目】
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广东省自然科学基金(No.000819);国家教育部留学回国人员科研启动基金(外教司No.[2001]345);汕头大学研究与发展基金(No.L00007)资助~~
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探讨显微切割过程中有效保持RNA完整性的组织固定方法,建立一种简易的手工显微切割法.应用自制“T形板”辅助冰冻切片,100%无水乙醇一次性脱水固定,“排除切割法”获取目的细胞,用TRIzol提取RNA,琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR分析RNA质量.“一步法”固定可长时间保存RNA的完整性;从食管癌标本5个特定阶段的细胞中提取的RNA,经电泳和RT-PCR分析均具有较高的质量.无水乙醇“一步法”固定,在显微切割的过程中可有效保持RNA的完整性;T形板和“排除切割法”简化了手工显微切割的操作,提取的RNA质、量均可满足后续分子水平研究的需要.
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