【摘 要】
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目的 探索自噬与CKD血管钙化之间的关系，以及自噬在CKD血管钙化中的作用。方法 首先将30只SD大鼠随机分为对照组（Control组，15只）和腺嘌呤及高磷饮食诱导的模型组（CKD组，15只）。免疫组化检测主动脉中α-SMA、RUNX2、LC3B及Beclin-1蛋白表达，新鲜主动脉做钙含量测定，进一步做它们之间的相关性分析。再构建β-GP诱导的主动脉平滑肌细胞（aorta smooth mus
【基金项目】
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四川省肾脏疾病临床医学研究中心重点项目（2019YFS0537-3）；
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目的 探索自噬与CKD血管钙化之间的关系，以及自噬在CKD血管钙化中的作用。方法 首先将30只SD大鼠随机分为对照组（Control组，15只）和腺嘌呤及高磷饮食诱导的模型组（CKD组，15只）。免疫组化检测主动脉中α-SMA、RUNX2、LC3B及Beclin-1蛋白表达，新鲜主动脉做钙含量测定，进一步做它们之间的相关性分析。再构建β-GP诱导的主动脉平滑肌细胞（aorta smooth muscle cell,ASMC）钙化模型。电镜检测细胞内自噬小体，免疫荧光及Western blot检测LC3B蛋白。自噬抑制剂3-MA及激活剂RAP干预自噬后，采用免疫组化、Western blot检测ASMC中α-SMA、RUNX2蛋白表达变化，茜素红染色及钙含量检测ASMC钙化情况。结果 模型组成功建立CKD血管钙化模型。与对照组相比，模型组主动脉α-SMA蛋白表达下降，RUNX2、LC3B、Beclin-1蛋白表达及钙含量升高。Beclin-1及LC3B蛋白表达分别与主动脉钙含量及RUNX2蛋白表达呈正相关。β-GP诱导ASMC自噬小体增加，LC3B荧光斑点增多，LC3BII蛋白表达增强（P＜0.01）。RAP激活自噬后减少ASMC钙沉积及钙含量（P＜0.05），减少RUNX2蛋白表达（P＜0.05），促进α-SMA蛋白表达（P＜0.05）;3-MA抑制自噬后结果与之相反。结论 CKD血管钙化同时存在自噬激活，自噬在CKD血管钙化中可能具有内源性保护作用，自噬有望成为CKD血管钙化新的治疗靶目标。
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