【摘 要】
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探讨不同细胞固定方法对细胞骨架染色的影响,以期发现适合于微丝与微管细胞骨架染色的固定方法。本文分别采用0.5%戊二醛、95%乙醇、4%甲醛及无水冷丙酮等四种固定液对人骨肉
【机 构】
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西北工业大学生命科学院,西北工业大学特殊环境生物物理学研究所,空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室;
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2008AA12A218);国家自然科学基金(No.30840030)资助项目~~
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探讨不同细胞固定方法对细胞骨架染色的影响,以期发现适合于微丝与微管细胞骨架染色的固定方法。本文分别采用0.5%戊二醛、95%乙醇、4%甲醛及无水冷丙酮等四种固定液对人骨肉瘤细胞MG-63进行固定,然后分别对微丝和微管进行染色、封片,采用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞微丝及微管骨架的形态。同时采用图像分析方法对细胞骨架微丝、微管荧光图像进行定量分析。结果表明,0.5%戊二醛固定的细胞,微丝呈清晰的束状纤维,微管呈有规律的束状纤维;95%乙醇固定的细胞,微丝纤维连贯性差,微管纤维非常清晰;4%甲醛固定的细胞,微丝纤维之间比较模糊,微管纤维呈圆弧状,联贯性较差;无水冷丙酮固定的细胞,微丝明显皱缩,呈模糊状,微管清晰可见,连贯性较好。因此,不同固定液固定的原理不同,要根据实验目的,选择合适的固定方法。
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