【摘 要】
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构建了己糖激酶GLK高效表达的工程菌株BL21(DE3)/pET—glk,考察了乳糖代替IPTG诱导己糖激酶GLK在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性。实验结果表明,工程菌对数生长中期(OD。00约为1.0)添
【基金项目】
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国家自然科学基金(青年基金)项目(20806060);天津市高等学校科技发展基金计划项目(20080601);天津科技大学人才科研启动引进基金(20080435)
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构建了己糖激酶GLK高效表达的工程菌株BL21(DE3)/pET—glk,考察了乳糖代替IPTG诱导己糖激酶GLK在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性。实验结果表明,工程菌对数生长中期(OD。00约为1.0)添加终浓度为10dL的乳糖于25℃的条件下诱导6h能获得最大量的目的蛋白和菌体量,目的蛋白表达量占总蛋白的30.45%,与IPTG诱导条件下的31.12%无明显差异。同时,乳糖诱导后收获的菌体量高于IPTG诱导,显示出了乳糖同样是一种T7启动子的廉价高效诱导剂,可以代替昂贵的IPTG用于己糖激酶
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