【摘 要】
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目的 探讨miR-181b对靶基因的金属蛋白酶组织抑制因子-3(tissue inhibitor of met-allo proteinases 3,TIMP-3)的调控作用及其对肝癌细胞体外侵袭迁移能力的影响.方法 采用qRT-PCR检测肝细胞癌(HCC)组织和不同人HCC细胞系中miR-181b的表达.Western-blot检测TIMP-3在HCC中蛋白的表达.选择miR-181b高表达HC
【机 构】
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广东医学院第一临床学院外科教研室, 东莞,523808;
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目的 探讨miR-181b对靶基因的金属蛋白酶组织抑制因子-3(tissue inhibitor of met-allo proteinases 3,TIMP-3)的调控作用及其对肝癌细胞体外侵袭迁移能力的影响.方法 采用qRT-PCR检测肝细胞癌(HCC)组织和不同人HCC细胞系中miR-181b的表达.West-blot检测TIMP-3在HCC中蛋白的表达.选择miR-181b高表达HCC细胞系SKHep-1,通过报告基因检测试验,观察miR-181b对TIMP-3的调控作用.分别通过Transwell小室和细胞划痕试验,观察阻断SKHep-1细胞miR-181b表达对其侵袭、迁移能力的影响.结果 miR-181b在HCC组织中mRNA的表达明显高于癌旁组织和正常肝组织(P＜0.01),其高表达与HCC高侵袭转移密切相关(P＜0.01).TIMP-3在HCC中蛋白表达明显低于癌旁组织和正常肝组织(P＜0.05).miR 181b在人HCC细胞Hep3B、HepG2、Huh-7、SKHep-1、SNU182、SNU449和肝细胞中均有表达,其中在SKHep-1中表达最高(P＜0.01).高表达miR-181b抑制带有TIMP-3 UTR的荧光素酶的表达(P＜0.05),抑制miR-181b不仅能降低SK-hep1的HCC细胞迁移能力(P＜0.05),还可降低其侵袭能力(P＜0.01).结论 miR-181b可能通过下调TIMP-3基因表达促进HCC侵袭和迁移能力.
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