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建立了柱前衍生化高效液相色谱法（HPLC）测定奶粉中羟脯氨酸含量的方法。以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,采用Elite AAK C18色谱柱（250mm×4.6mm i.d.,5μm）;0.05mol/L乙酸钠,乙腈/水（50：50,V：V）为流动相梯度洗脱;流速1.2mL/min;检测波长360nm;柱温27℃。结果表明：羟脯氨酸标准品在0.04～10.00mg/L范围内线性相关系数为0.9999;方法检出限为30mg/kg（S/N=10）;加标浓度为0.05,8.0mg/L的平行5次测试结果