bcr-abl融合基因真核表达载体诱导小鼠特异性免疫应答

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目的 在小鼠体内外研究bcr-abl融合基因真核表达载体诱导的特异性免疫应答,探索肿瘤免疫治疗的新途径.方法构建表达bcr-abl融合基因cDNA片段的真核细胞质粒pVbcr-abl,将pVbcr-abl质粒用纳米颗粒聚乙烯亚胺包裹后给BALB/c小鼠肌内注射,检测小鼠血清中bcr-abl特异性抗体水平.小鼠免疫后20 d皮下接种具有相同遗传背景的SP2/0/bcr-abl细胞(H-2d),观察小鼠生存情况、移植肿瘤的生长情况和肿瘤细胞浸润情况.利用免疫组织化学方法观察肿瘤组织中T淋巴细胞浸润情况;流式细胞术分析免疫小鼠脾脏T细胞亚群的变化;LDH释放法检测脾脏细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性.结果成功构建真核表达载体pVbcr-abl,bcr-abl融合基因cDNA片段在真核细胞中可得到高效表达.pVbcr-abl免疫BALB/c小鼠能激活机体免疫系统,诱导产生特异性抗体和特异性CTL活性,并形成特异性免疫保护力.免疫小鼠的移植肿瘤形成时间、表面出现破溃时间、生长速度明显降低,荷瘤生存时间明显延长.免疫小鼠移植肿瘤组织中有大量CD3+T细胞浸润.免疫小鼠的脾细胞杀伤SP2/0/bcr-abl细胞的细胞毒活性明显升高.小鼠脾脏T细胞亚群发生改变,CD4+/CD8+细胞比值升高到1.54±0.29.结论pVbcr-abl真核表达载体除能在小鼠体内诱导产生特异性抗体以外,还能诱导高水平特异性CTL活性,直接杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞的生长速度。

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