观察脂联素对人乳腺癌MCF7细胞株生长抑制的影响及探讨其可能的作用机制。
方法RPMI 1640培养基培养MCF7细胞。应用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MCF7细胞脂联素受体的表达。观察脂联素(20、40 μg/ml)作用48 h后对细胞计数、细胞周期的影响。检测脂联素对细胞磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)/总腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPKα)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)/蛋白激酶B(Akt)、细胞周期素D1(cyclinD1)及细胞周期素E2(cyclinE2)表达的影响。采用方差分析进行统计学分析。
结果(1)MCF7细胞表达脂联素受体1和受体2。(2)脂联素对MCF7细胞的生长具有抑制作用，且此作用呈现为剂量依赖性。当脂联素浓度为20和40 μg/ml时，MCF7的细胞计数分别为对照组的86.7%和72.9%(F＝20.438，P<0.05)。(3)脂联素可抑制MCF7细胞的增殖，使较多的细胞停留于G1/G0期(对照组为45.1%±0.7%，20 μg/ml脂联素组49.1%±1.3%，40 μg/ml脂联素组50.1%±1.1%，F＝17.339，P<0.05)，而S期细胞比例相对减少(对照组39.9%±1.2%，20 μg/ml脂联素组36.4%±1.5%，40 μg/ml脂联素组36.0%±2.1%，F＝9.715，P<0.05)，此作用呈剂量依赖性。(4)脂联素作用30 min可增加MCF7细胞p-AMPKα (Thr172)表达(对照组、20、40 μg/ml脂联素组相对表达量分别为0.44±0.01、0.67±0.02、0.72±0.03，F＝91.07，P<0.05)，作用24 h可降低cyclin D1的表达(对照组、20、40 μg/ml脂联素组相对表达量分别为0.81±0.03、0.70±0.03、0.59±0.03，F＝30.25，P<0.05)，作用48 h可降低cyclin E2的表达(对照组、20、40 μg/ml脂联素组相对表达量分别为0.83±0.04、0.72±0.02、0.64±0.02，F＝21.17，P<0.05)。
结论脂联素可抑制乳腺癌细胞株MCF7的生长，其作用机制可能与AMPK激活、降低cyclin D1和cyclinE2表达有关。