【摘 要】
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<正>目的探讨 CHK2在前列腺癌中的表达状况及其与基因组不稳定性的关系,研究 CHK2表达异常与临床指标间的相关性。方法用定量 RT-PCR 和蛋白杂交方法分析 CHK2 mRNA 和蛋白水
【机 构】
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天津市人民医院放疗科; 天津市人民医院泌尿科; 天津市人民医院分子生物室; 天津市人民医院肿瘤科;
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<正>目的探讨 CHK2在前列腺癌中的表达状况及其与基因组不稳定性的关系,研究 CHK2表达异常与临床指标间的相关性。方法用定量 RT-PCR 和蛋白杂交方法分析 CHK2 mRNA 和蛋白水平；用 real time PCR 检测 CHK2 mRNA 表达水半；用流式细胞仪、DHPLC 和直接测序法行染色体倍体分析和基因突变的检测。结果在良性前列腺细胞系 BPH 和前列腺癌细胞系 LnCap、PC-3、DU-145和22RV1中,发现 BPH 的 CHK2 mRNA 水平较前列腺癌细胞系 LnCap、PC-3、 DV-145和22RV1低2～3倍。提取细胞系的蛋白后行蛋白杂交,也显示出 CHK2蛋白水平在前列腺癌细胞系中明显增加。 CHK2 mRNA 和蛋白水平在前列腺癌标本及其周围正常组织之间有差异,但是,多数肿瘤组织中的 CHK2 mRNA 和蛋白水平下降。以上结果均经 Real-time PCR 所证实,一半以上前列腺癌 CHK2 mRNA 水平较正常对照明显减低(x~2=24, p＜0．01)。根据 CHK2在细胞遗传稳定性中所发挥的作用,检测细胞内 p53、CHK2基因突变情况和肿瘤细胞倍体状态。结果显示,CHK2的表达受三方面情况影响较多,即肿瘤内基因及染色体状态、Gleason 分级(x~2=3,p＞0．05)和年龄 (x~2=4．1．p＜0．05)。在不同的细胞状态、组织学分级中均存在年龄的差别,也即 CHK2 mRNA 下降组年龄较 CHK2 mRNA 不变或上升组的年龄高2～9．2岁,平均高6岁。结论 CHK2 mRNA 和蛋白水平在大多数前列腺癌标本中均下降,CHK2 突变与否和年龄是影响其表达水平的主要因素,提示 CHK2在前列腺癌发生发展中发挥重要的作用。
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