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目的:
①探讨急性冠脉综合征患者外周血单核细胞共刺激分子B7-1、B7-2及血清高敏C-反应蛋白的水平。②探讨外周血单核细胞共刺激分子B7-1、B7-2和B7-1/B7-2比率及血清高敏C-反应蛋白在发病中的作用,为进一步研究急性冠脉综合征的病因、发病机制、治疗及预防提供新的思路。③探讨外周血单核细胞共刺激分子B7-1、B7-2的表达水平与急性冠脉综合征病情程度的相关性。④探讨血清高敏C-反应蛋白血清水平与急性冠脉综合征病情程度的相关性。⑤探讨外周血单核细胞共刺激分子B7-1、B7-2和B7-1/B7-2比率的表达水平与血清高敏C-反应蛋白的相关性。
方法:
1.实验对象:(1)选择在2005年11月-2006年8月因冠状动脉粥样硬化性心脏病于石家庄市中心医院和河北医科大学第一医院心内科检查和住院的患者42例作为实验组,其中急性冠脉综合征组28例,年龄40~71岁,平均(57±11)岁,包括急性心肌梗塞(AMI)患者14例,其中男性8例,女性6例,年龄40~69岁,平均(58±9)岁,8例有高血压病;不稳定性心绞痛(UA)患者14例,其中男性9例,女性5例,年龄45~71岁,平均(55±8)岁,7例有高血压病;稳定型心绞痛(SA)患者14例,其中男性7例,女性7例,年龄50~70岁,平均(59±5)岁,7例有高血压病。(2)另选取石家庄市中心医院健康体检的志愿者14例为对照组,其中男性7例,女性7例,年龄45~65岁,平均(55±5)岁,6例有高血压病。各组年龄、性别、血压、血糖、血脂间差异无统计学意义。诊断标准均按叶任高、陆再英主编第6版《内科学》。所有患者均为初次发病,且无其它合并症如糖尿病、脑血管意外、NYHA分级Ⅲ~Ⅳ级心力衰竭等。排除标准:合并周围血管疾病或周围血管栓塞性疾病者,脑卒中患者,脑出血患者,各种具有明确感染灶的急慢性感染患者,肿瘤、免疫系统疾病(如风湿、类风湿、系统性红斑狼疮等)、严重肝肾疾患,血液系统疾病,妊娠期及哺乳期妇女,入院前己服用调脂药物及免疫调节药物、应用炎症抑制药物如非甾体类抗炎药、类固醇及鸦片类药物的患者。
2.血标本采集及单核细胞的分离:所有入选的急性冠脉综合征患者在典型症状(包括胸闷、胸痛)发生后48小时内(治疗前)抽取全血4ml,其中2ml采用免疫比浊法测定hs-CRP的含量。另2ml注入肝素无菌管中于1小时内采用贴附法分离单核细胞送流式检验共刺激分子B7-1、B7-2百分比并计算B7-1/B7-2比率。稳定性心绞痛(未发病时)及对照组空腹抽血4 ml分别按上述方法测定hs-CRP、共刺激分子B7-1、B7-2及B7-1/B7-2比率。
3.实验方法:运用流式细胞技术检测外周血单核细胞共刺激分子B7-1、B7-2的表达百分比并计算B7-1/B7-2比率;采用免疫比浊法测定血清hs-CRP的含量。
结果:
1.外周血单核细胞中共刺激分子B7-1、B7-2细胞百分比及B7-1/B7-2比率的表达:(1)急性冠脉综合征组中急性心肌梗死组外周血单核细胞中共刺激分子B7-1细胞百分比(11.99±2.49%)显著高于稳定性心绞痛组及正常对照组,有统计学意义(P<0.01);不稳定性心绞痛组B7-1细胞百分比(11.95±2.93%)显著高于稳定性心绞痛组及正常对照组,有统计学意义(P<0.01),急性心肌梗死组B7-1细胞百分比(11.99±2.49%)与不稳定性心绞痛组(11.95±2.93%)间的差异无统计学意义(P>0.05);稳定性心绞痛组B7-1细胞百分比(9.16±2.42%)与健康对照组(8.20±2.29%)外周血单核细胞B7-1百分比相似,无统计学意义(P>0.05)。(2)稳定性心绞痛组外周血单核细胞中共刺激分子B7-2细胞百分比的表达率(20.42±4.12%)、不稳定性心绞痛组(19.08±3.88%)和急性心肌梗死组(18.63±3.09%)虽依次降低且均低于对照组(21.73±5.30%),但各组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)急性冠脉综合征组中急性心肌梗死组单核细胞中共刺激分子B7-1/B7-2比率(0.66±0.17)显著高于稳定性心绞痛组及正常对照组,有统计学意义(P<0.01);不稳定性心绞痛组B7-1/B7-2比率(0.65±0.24)显著高于稳定性心绞痛组及正常对照组,有统计学意义(P<0.01),急性心肌梗死组B7-1/B7-2比率(0.66±0.17)与不稳定性心绞痛组(0.65±0.24)间的差异无统计学意义(P>0.05);稳定性心绞痛组(0.47±0.15)高于对照组(0.39±0.12),但是无统计学意义(P>0.05);在各组中对照组B7-1/B7-2比率最低。 2.血清hs-CRP在各组中的表达水平:在急性冠脉综合征组患者中,急性心肌梗死组血清hs-CRP水平(14.10±3.73mg/l)显著高于稳定性心绞痛组(6.63±2.28mg/l)和正常对照组(5.50±2.47mg/l),有统计学意义(P<0.01);不稳定性心绞痛组(10.62±3.14mg/l)显著高于稳定性心绞痛组(6.63±
2. 28mg/l)和正常对照组(5.50±2.47mg/l),有统计学意义(P<0.01);急性心肌梗死组(14.10±3.73mg/l)与不稳定性心绞痛组(10.62±3.14mg/l)间的差异亦具有统计学意义(P<0.01、);稳定性心绞痛组与健康对照组血清hs-CRP水平相似,无统计学差异(P>0.05)。
3.急性冠脉综合征患者外周血单核细胞共刺激分子B7-1与血清高敏C-反应蛋白的相关性:急性冠脉综合征患者外周血单核细胞共刺激分子B7-1与该患者血清高敏C-反应蛋白存在正相关(r=0.76,P<0.001)。
4.急性冠脉综合征患者外周血单核细胞共刺激分子B7-1/B7-2比率与血清高敏C-反应蛋白的相关性:急性冠脉综合征患者外周血单核细胞共刺激分子B7-1/B7-2比率与该患者血清高敏C-反应蛋白存在正相关(r=0.83,P<0.001)。
结论:
1.外周血单核细胞共刺激分子B7-1、B7-2的表达及其B7-1/B7-2比率在急性冠脉综合征患者与对照组及稳定性心绞痛患者有明显的差异。
2.外周血单核细胞表面共刺激分子B7-1、B7-2的表达异常及B7-1/B7-2比率失衡可能在急性冠脉综合征的发病中起重要作用。
3.本研究中急性冠脉综合征患者外周血单核细胞B7-1/B7-2比率均显著高于健康对照组,提示急性冠脉综合征患者体内存在着免疫失衡现象。
4.本研究中发现随着急性冠脉综合征病情的发展,外周血单核细胞表面共刺激分子B7-1表达百分比显著增高,在一定程度上B7-1的改变也反映着病情的变化。
5.本研究中同样急性冠脉综合征随着病情的发展,共刺激分子B7-1/B7-2比率的失衡愈加严重。在一定程度上B7-1/B7-2比率的改变也反映着病情的变化。 6.急性冠脉综合征的病情严重程度与患者外周血单核细胞表面共刺激分子B7-1的表达水平及B7-1/B7-2比率呈正相关。
7.外周血血清hs-CRP与急性冠脉综合征的发病有明显的相关性。本研究发现急性冠脉综合征患者血清hs-CRP水平显著升高,在急性冠脉综合征患者与对照组及稳定性心绞痛患者有明显的差异。随着急性冠脉综合征病情的发展,hs-CRP的水平明显升高。
8.本研究中发现急性冠脉综合征随着病情的发展,hs-CRP的水平显著升高,表明冠脉内发生了炎症反应,反映了病变的严重程度,为急性冠脉综合征的预后提供判断依据。
9.本研究中发现急性冠脉综合征患者外周血单核细胞表面共刺激分子B7-1的表达水平及B7-1/B7-2比率与外周血hs-CRP存在相关性。
10.本研究提示B7-1的表达升高,B7-2的表达受抑制可能是急性冠脉综合征发生的重要原因和发病环节。综合评价B7-1和B7-2的异常表达在急性冠脉综合征中的发生机制,可能为急性冠脉综合征治疗提供病因学依据。