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血吸虫病是由血吸虫感染引起的一种对社会、经济发展危害严重的人畜共患寄生虫病。雌虫产生的虫卵是血吸虫病导致病理损伤的主要因素,同时也是该疾病传播的根本原因。因此,研究血吸虫生殖发育相关的基因功能,从控制血吸虫生殖发育来控制血吸虫病的发生具有重要意义。本研究克隆和表达了日本血吸虫胚胎致死异常视觉基因1(SjELAV-like 1),并分析了该基因在日本血吸虫体内的表达情况及定位,探究该基因对日本血吸虫形态和生殖发育的影响。利用PCR技术获得SjELAV-like 1基因序列(Gene Bank登录号:MG515727),获得的SjELAV-like 1基因序列长1797bp,其中编码序列为1533 bp,编码510个氨基酸。通过构建该序列的重组表达质粒pET28-SjELAV-like 1,并在大肠杆菌BL21中利用IPTG诱导表达,收集诱导0h,1h,2h,3h,4h,6h,8h的菌体,SDS-PAGE法进行蛋白电泳发现,重组蛋白主要存在于包涵体中,且在诱导4h时表达量最高。利用His镍柱亲和层析法纯化大量表达所得重组蛋白,用纯化重组蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,Western blotting分析发现该重组蛋白具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验表明SjELAV-like 1蛋白主要分布在日本血吸虫体体被。小鼠腹部贴片法感染日本血虫尾蚴,收集虫体不同时期和不同时期合抱分开的雌、雄虫体,以单钉螺逸出的尾蚴和混合钉螺逸出的尾蚴分别感染小鼠获得25 d单性雌、雄虫体和合抱分开的雌、雄虫体,Trizol法提取总RNA,实时定量PCR分析SjELAV-like 1基因的表达情况发现,该基因在不同发育阶段和不同发育阶段雌、雄虫体内均有表达,在雄虫体内表达稳定,但在雌虫体内随着发育成熟其表达水平呈下降趋势;在不同感染状态的雌、雄虫体内,与正常发育雌虫相比,该基因在发育阻遏雌虫体内高表达,而在雄虫体内无明显差异。小鼠尾静脉注射法进行最佳小干扰RNA(siRNA)的筛选,用于长期RNA干扰(RNAi)试验,与NC组相比,所筛选的小干扰RNA S2具有良好的干扰效果,长期干扰组小鼠肝减卵率、雌虫对肝卵贡献减少率和卵胚减孵化率分别为58.27%(P<0.05)、40.59%(P<0.01)和74.58%(P<0.01);电镜观察发现,与对照组相比,干扰组虫体体被结构改变,雄虫体表粘附的泡状物消失,立体的褶脊结构塌陷,整齐排列的条索状皮脊变的疏松,网状结构消失,雌虫体壁表面组织间隙增宽,分布于其上的体棘减少、变钝,雄虫精母细胞数目减少,其内的染色质减少,细胞肿大,细胞间质增宽,雌虫卵黄细胞中卵黄球减少,其中包含的卵黄滴也减少,内质网肿大,皮质颗粒排列散乱。本研究成功克隆和表达了在日本血吸虫发育阻遏雌虫中高表达的部分SjELAV-like 1基因序列,且发现该基因主要在虫体体被表达。该基因沉默使肝脏荷卵数、雌虫对肝卵贡献率和卵胚孵化率均显著性降低,并改变虫体体被结构,抑制生殖器官的正常发育,提示该基因对日本血吸虫的生殖发育有重要的作用。