【摘 要】
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本研究的目的是进一步观察在睾酮诱导的小鼠骨髓巨噬细胞凋亡过程中是否有Fas途径中一些关键酶的活化以及线粒体途径是否也参与这个过程。试验方法:无菌条件下分离6周龄雌性小
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本研究的目的是进一步观察在睾酮诱导的小鼠骨髓巨噬细胞凋亡过程中是否有Fas途径中一些关键酶的活化以及线粒体途径是否也参与这个过程。
试验方法:
无菌条件下分离6周龄雌性小鼠骨髓细胞,在巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的作用下培养5天,使之向巨噬细胞定向分化。用FITC标记的大鼠抗小鼠F4/80抗体经流式细胞仪测定巨噬细胞纯度并分选出F4/80阳性细胞(巨噬细胞)。然后分别用不同浓度的睾酮(1 nM、10 nM和100 nM)处理24h,对照组不作任何处理。首先进行DNA片段电泳观察不同处理组凋亡发生情况。然后用实时定量 PCR对caspase-8、caspase-3、PARP、Bid、Cyt c、Apaf-1及caspase-9的表达进行相对定量,并用Western Blot分析caspase-8、caspase-3、PARP的蛋白表达和活化。
结论:
1.睾酮在体外直接作用于小鼠骨髓巨噬细胞后,可诱导其凋亡。
2.在睾酮诱导的小鼠骨髓巨噬细胞凋亡中伴有caspase-8和caspase-3的活化。
3.线粒体途径可能也参与了睾酮诱导的小鼠骨髓巨噬细胞凋亡。
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