论文部分内容阅读
复心汤是由附子、黄芪、葶苈子三药组成，是导师山东中医药大学附属医院薛一涛教授治疗慢性心力衰竭的基础方和效验方，在临床中取得了良好疗效。本论文的研究内容主要分为三大关联的部分，第一部分应用常规和网状Meta分析的方法对复心汤联合西医方案治疗慢性心衰的疗效进行直接和间接比较，以评价复心汤的疗效如何；第二部分基于网络药理学方法预测复心汤治疗心力衰竭的可能作用机制；第三部分应用动物实验的方法研究复心汤治疗心衰大鼠的线粒体通透性转换孔机制。
第一部分基于常规和网状Meta分析对复心汤联合西医方案治疗慢性心力衰竭疗效的直接及间接比较
目的：运用常规Meta分析直接比较复心汤观察组与西医对照组治疗慢性心力衰竭的疗效差异。运用网状Meta分析间接比较复心汤观察组与非复心汤观察组治疗慢性心力衰竭的疗效差异。
方法：计算机配合手工检索国内外常用数据库，筛选出符合纳入标准和排除标准的相关文献，进行文献质量评估，采用RevMan5.3软件进行常规Meta分析，采用WinBUGS14软件进行网状Meta分析。
结果：最终有15篇随机对照临床试验文献纳入研究，其中14篇中文文献和1篇外文文献，共计1412例患者,其中对照组648例，观察组764例。常规Meta分析结果显示，复心汤观察组与西医对照组比较，在中医证候评价(P＜0.0001)、NYHA心功能分级(P＜0.0001)、左室射血分数(P＜0.0001)、血浆BNP水平(P＜0.0001)等疗效指标方面，均显著优于西医对照组，具有统计学意义。网状Meta分析结果显示，复心汤观察组与非复心汤观察组比较，各个疗效指标并无统计学差异。但在中医证型评价、NYHA心功能分级、血浆BNP水平方面，复心汤观察组优于其他组的疗效排位(Rank 1)概率明显高于非复心汤组，左室射血分数EF值疗效排位概率，则不如非复心汤观察组。
结论：复心汤加味化裁配合西医方案治疗慢性心衰在中医证候评价、心功能等级、左室射血分数、血浆BNP水平方面优于西医对照组，显示了良好疗效。在中医证候评价、NYHA心功能分级、血浆BNP水平方面与非复心汤观察组比较虽无统计学差异，但具有较大概率优于非复心汤观察组，需要更多的相关研究参与进一步观察。
第二部分基于网络药理学探讨复心汤治疗心力衰竭的作用机制
目的：基于网络药理学对复心汤治疗心力衰竭的作用机制进行分析预测。
方法：应用网络药理学相关工具及方法，获得复心汤入血活性成分、作用靶点，以及心力衰竭的疾病靶点，找出复心汤作用于心衰的关键靶点和核心团簇，分析相关信号通路，以探究可能的分子机制。
结果：复心汤经预测，含有53种入血成分，作用涵盖224个靶点，其中作用于心衰的有94个直接作用靶点，经网络推测延伸整合，获得了由675个节点、3085种关系组成的PPI网络，从中筛选出最核心最重要的255个核心靶点和1个核心团簇，核心团簇由56个靶点、297种作用关系组成。经KEGG通路分析推断出HSP90、PI3K、AKT、MAPK相关基因、腺苷酸环化酶、鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(G蛋白)相关基因是复心汤作用于心衰的最关键、最密切、最有可能的作用点。
结论：复心汤治疗心衰作用机制与βARs-G蛋白-腺苷酸环化酶通路、PI3K-Akt信号通路和HSP90、MAPK等基因、蛋白相关。
第三部分复心汤治疗心衰大鼠的线粒体通透性转换孔机制研究
目的:观察复心汤治疗心衰大鼠的疗效及与线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore，mPTP)开放程度的相关性，揭示复心汤治疗心衰的mPTP机制。
方法：随机方法建立空白对照组、心衰模型组、西药对照组、复心汤组四个试验组，每组20只大鼠。采用阿霉素腹腔注射Wistar大鼠建立心力衰竭模型。按干预方法处理6周后，比较各组大鼠死亡率、血清BNP值，心脏彩超评测心功能情况，测定各组大鼠心肌线粒体在mPTP开放诱导剂作用下A540吸光度的改变，以评测心肌线粒体mPTP的开放程度。观察复心汤组各疗效数值与心肌线粒体mPTP开放程度的相关性。
结果:复心汤组与模型组比较，在改善死亡率(P＜0.01)、心脏彩超各测量指标[LVEDD(P＜0.01)、LVEDS(P＜0.01)、FS(P＜0.01)、EF(P＜0.01)]、血清BNP(P＜0.01)及mPTP开放程度(P＜0.01)等方面具有非常显著的疗效。复心汤组与西药对照组比较，在改善死亡率(P＜0.05)、心脏彩超各测量指标[LVEDD(P＜0.01)、LVEDS(P＜0.01)、FS(P＜0.01)、EF(P＜0.01)]、血清BNP(P＜0.01)及mPTP开放程度(P＜0.01)等方面也具有显著的疗效。复心汤组心脏彩超LVEDD值(P=0.728)与mPTP的变化值ΔA540/Initial值无显著相关性，心脏彩超LVEDS值(P＜0.05)、血清BNP值(P＜0.05)与mPTP的变化值ΔA540/Initia值成负相关，心脏彩超FS值(P＜0.01)、EF值(P＜0.01)与mPTP的变化值ΔA540/Initial值成正相关。
结论:复心汤治疗心衰大鼠在改善死亡率、血清BNP值、心脏彩超测量值等指标方面有良好疗效，并能有效改善心衰大鼠心肌线粒体mPTP开放程度，而且两者具有相关性。因此推断复心汤可能通过改善心衰大鼠心肌线粒体mPTP开放程度改善了心肌线粒体能量代谢及心肌凋亡情况，使复心汤取得疗效。
第一部分基于常规和网状Meta分析对复心汤联合西医方案治疗慢性心力衰竭疗效的直接及间接比较
目的：运用常规Meta分析直接比较复心汤观察组与西医对照组治疗慢性心力衰竭的疗效差异。运用网状Meta分析间接比较复心汤观察组与非复心汤观察组治疗慢性心力衰竭的疗效差异。
方法：计算机配合手工检索国内外常用数据库，筛选出符合纳入标准和排除标准的相关文献，进行文献质量评估，采用RevMan5.3软件进行常规Meta分析，采用WinBUGS14软件进行网状Meta分析。
结果：最终有15篇随机对照临床试验文献纳入研究，其中14篇中文文献和1篇外文文献，共计1412例患者,其中对照组648例，观察组764例。常规Meta分析结果显示，复心汤观察组与西医对照组比较，在中医证候评价(P＜0.0001)、NYHA心功能分级(P＜0.0001)、左室射血分数(P＜0.0001)、血浆BNP水平(P＜0.0001)等疗效指标方面，均显著优于西医对照组，具有统计学意义。网状Meta分析结果显示，复心汤观察组与非复心汤观察组比较，各个疗效指标并无统计学差异。但在中医证型评价、NYHA心功能分级、血浆BNP水平方面，复心汤观察组优于其他组的疗效排位(Rank 1)概率明显高于非复心汤组，左室射血分数EF值疗效排位概率，则不如非复心汤观察组。
结论：复心汤加味化裁配合西医方案治疗慢性心衰在中医证候评价、心功能等级、左室射血分数、血浆BNP水平方面优于西医对照组，显示了良好疗效。在中医证候评价、NYHA心功能分级、血浆BNP水平方面与非复心汤观察组比较虽无统计学差异，但具有较大概率优于非复心汤观察组，需要更多的相关研究参与进一步观察。
第二部分基于网络药理学探讨复心汤治疗心力衰竭的作用机制
目的：基于网络药理学对复心汤治疗心力衰竭的作用机制进行分析预测。
方法：应用网络药理学相关工具及方法，获得复心汤入血活性成分、作用靶点，以及心力衰竭的疾病靶点，找出复心汤作用于心衰的关键靶点和核心团簇，分析相关信号通路，以探究可能的分子机制。
结果：复心汤经预测，含有53种入血成分，作用涵盖224个靶点，其中作用于心衰的有94个直接作用靶点，经网络推测延伸整合，获得了由675个节点、3085种关系组成的PPI网络，从中筛选出最核心最重要的255个核心靶点和1个核心团簇，核心团簇由56个靶点、297种作用关系组成。经KEGG通路分析推断出HSP90、PI3K、AKT、MAPK相关基因、腺苷酸环化酶、鸟嘌呤核苷酸结合蛋白(G蛋白)相关基因是复心汤作用于心衰的最关键、最密切、最有可能的作用点。
结论：复心汤治疗心衰作用机制与βARs-G蛋白-腺苷酸环化酶通路、PI3K-Akt信号通路和HSP90、MAPK等基因、蛋白相关。
第三部分复心汤治疗心衰大鼠的线粒体通透性转换孔机制研究
目的:观察复心汤治疗心衰大鼠的疗效及与线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore，mPTP)开放程度的相关性，揭示复心汤治疗心衰的mPTP机制。
方法：随机方法建立空白对照组、心衰模型组、西药对照组、复心汤组四个试验组，每组20只大鼠。采用阿霉素腹腔注射Wistar大鼠建立心力衰竭模型。按干预方法处理6周后，比较各组大鼠死亡率、血清BNP值，心脏彩超评测心功能情况，测定各组大鼠心肌线粒体在mPTP开放诱导剂作用下A540吸光度的改变，以评测心肌线粒体mPTP的开放程度。观察复心汤组各疗效数值与心肌线粒体mPTP开放程度的相关性。
结果:复心汤组与模型组比较，在改善死亡率(P＜0.01)、心脏彩超各测量指标[LVEDD(P＜0.01)、LVEDS(P＜0.01)、FS(P＜0.01)、EF(P＜0.01)]、血清BNP(P＜0.01)及mPTP开放程度(P＜0.01)等方面具有非常显著的疗效。复心汤组与西药对照组比较，在改善死亡率(P＜0.05)、心脏彩超各测量指标[LVEDD(P＜0.01)、LVEDS(P＜0.01)、FS(P＜0.01)、EF(P＜0.01)]、血清BNP(P＜0.01)及mPTP开放程度(P＜0.01)等方面也具有显著的疗效。复心汤组心脏彩超LVEDD值(P=0.728)与mPTP的变化值ΔA540/Initial值无显著相关性，心脏彩超LVEDS值(P＜0.05)、血清BNP值(P＜0.05)与mPTP的变化值ΔA540/Initia值成负相关，心脏彩超FS值(P＜0.01)、EF值(P＜0.01)与mPTP的变化值ΔA540/Initial值成正相关。
结论:复心汤治疗心衰大鼠在改善死亡率、血清BNP值、心脏彩超测量值等指标方面有良好疗效，并能有效改善心衰大鼠心肌线粒体mPTP开放程度，而且两者具有相关性。因此推断复心汤可能通过改善心衰大鼠心肌线粒体mPTP开放程度改善了心肌线粒体能量代谢及心肌凋亡情况，使复心汤取得疗效。