【摘 要】
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目的:探讨sCD40L对白血病Nalm-6细胞株增殖、凋亡影响的研究。方法:(1)通过CCK-8法检测不同浓度sCD40L对急性淋巴细胞白血病Nalm-6细胞体外增殖的影响,并确定最佳处理浓度;(2)通过Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;(3)流式细胞术检测sCD40L处理Nalm-6细胞后相关凋亡因子Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。结果:(1)CCK-8显示:不同浓度sCD
【基金项目】
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课题基金来源:贵州省科技厅联合基金(黔科合LH字[2015]7468号);
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目的:探讨sCD40L对白血病Nalm-6细胞株增殖、凋亡影响的研究。方法:(1)通过CCK-8法检测不同浓度sCD40L对急性淋巴细胞白血病Nalm-6细胞体外增殖的影响,并确定最佳处理浓度;(2)通过Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;(3)流式细胞术检测sCD40L处理Nalm-6细胞后相关凋亡因子Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。结果:(1)CCK-8显示:不同浓度sCD40L处理Nalm-6细胞24h、48h、72h后均有不同程度的抑制作用,与地塞米松磷酸钠组(阳性对照组)及Nalm-6细胞组(阴性对照组)相比较,均有显著差异(P<0.05);细胞增殖抑制率随时间延长而逐渐增加,在72h时细胞抑制率最明显;细胞增殖抑制率随浓度增加而逐渐增加,在5.00μg/ml的sCD40L在72h时增殖抑制率最明显;但在4.00μg/ml和5.00μg/ml sCD40L的细胞增殖抑制率无统计学意义(P>0.05),故选用4.00μg/ml浓度为后续实验。(2)采用AnnexinV-FITC/PI双染色显示:sCD40L处理Nalm-6细胞后24h、48h、72h后,在48h时sCD40L对Nalm-6细胞凋亡率最明显;与Nalm-6细胞组及地塞米松磷酸钠组相比均有显著差异(P<0.05)。(3)采用流式细胞术显示:sCD40L处理Nalm-6细胞后24h、48h、72h后,Bax蛋白的表达在24h、48h、72h均有显著性差异(P<0.05),且在48h时上调最明显。Bcl-2蛋白的表达在24h、48h、72h均有显著性差异(P<0.05),且在48h时下调最明显。结论:(1)sCD40L能够抑制Nalm-6细胞增殖并诱导其凋亡,与作用浓度、时间相关;(2)sCD40L诱导Nalm-6细胞凋亡可能与Bax/Bcl-2介导的线粒体信号途径有关。
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