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目的:
通过长波紫外线照射人晶状体上皮细胞的模型,探索干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因19(geneassociatedwith retinoid-IFN-induced mortality-19,GRIM-19)在人晶体上皮细胞损伤中的表达变化,与细胞凋亡率之间的相关性。
方法:
体外培养人晶状体上皮细胞(human lensepith elium,HLE)SRA01/04,长波紫外线(ultra violet A,UVA)照射,对照组照射剂量OmJ/cm2,实验组分别为30mJ/cm2、60MJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2。流式细胞仪测定各组细胞的凋亡率,蛋白质免疫印记(Westem-blot)检测各组测定GRIM-19蛋白表达,统计学软件SPSS16.0的pearson分析两者之间的相关性。
结果:
流式细胞仪检测照射剂量为60MJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2实验组细胞凋亡率(24.94±3.52、36.42±3.80、42.32±5.97、13.92±1.92)与对照组(1.06±0.77)比较,差异有统计学意义,(F=149.32,P<0.01)。蛋白质免疫印记结果显示:60MJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2实验组的GRIM-19蛋白相对表达量(2.01±0.76、2.98±1.8、3.97±1.61、2.42±1.28)与对照组(0.56±0.23)比较,差异有统计学意义,(F=6.87,P<0.01)。细胞凋亡率与GRIM-19蛋白相对表达量呈正相关(r=0.71,P=0.00)。实验组30MJ/cm2细胞凋亡率(3.50±2.02)与对照组(1.06±0.77)比较,差异无统计学意义,(P>0.05);实验组30Mj/cm2GRIM-19蛋白相对表达量(1.00±0.45)与对照组(0.56±0.23)比较,差异无统计学意义,(P>0.05)。
结论:
人晶状体上皮细胞中存在干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因19表达,人晶状体上皮细胞凋亡率及干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因19蛋白相对表达量与长波紫外线照射剂量呈梯度依赖性。照射剂量为120mJ/cm2时,细胞凋亡率与干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关的基因19蛋白相对表达量最高。人晶状体上皮细胞的凋亡率与GRIM-19蛋白相对表达量呈正相关。