【摘 要】
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砂仁(Amomum villosum Lour.)是我国“四大南药”之一,广泛种植于南方。近年来,砂仁的多酚和多糖成为研究热点,其活性成分的研究还有待进一步深入探讨。本论文研究了砂仁酚类物质提取条件的优化,并对砂仁酚类物质进行分离、鉴定及评价其生物活性,阐明了砂仁中的生物活性物质之一是酚类物质;研究了碱提砂仁多糖的理化性质,评价砂仁多糖的体外抗氧化性;探讨了砂仁压片糖果的配方研发,得出结论如下:通
【基金项目】
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农业农村部热带作物产品加工所自由探索开放课题:益智仁和砂仁多糖与多酚类物质研究;
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砂仁(Amomum villosum Lour.)是我国“四大南药”之一,广泛种植于南方。近年来,砂仁的多酚和多糖成为研究热点,其活性成分的研究还有待进一步深入探讨。本论文研究了砂仁酚类物质提取条件的优化,并对砂仁酚类物质进行分离、鉴定及评价其生物活性,阐明了砂仁中的生物活性物质之一是酚类物质;研究了碱提砂仁多糖的理化性质,评价砂仁多糖的体外抗氧化性;探讨了砂仁压片糖果的配方研发,得出结论如下:通过正交试验,以总酚含量为指标,对其提取条件进行优化,确定砂仁总酚提取的最佳条件为:提取温度为80°C,提取时间为120 min,乙醇的提取分数为40%,料液比为1:25 g/m L。采用该提取条件,砂仁总酚提取含量最高为19.65mg/g。通过对不同溶剂分级萃取砂仁酚类物质,其酚类物质主要富集在乙酸乙酯组分(Fr-Et OAc)中,总酚含量为374.01 mg RE/g DW,总黄酮含量为93.11 mg GAE/g DW,正丁醇组分(Fr-Bu OH)次之。采用UHPLC-ESI-QTOF-MS/MS方法,在Fr-Et OAc中鉴定出35种物质,包括包括2种有机酸、12种酚酸及其衍生物、12种黄酮及其衍生物、7种原花青素以及2种氧化脂类。分别为柠檬酸、苹果酸、原儿茶酸、对香豆酸、香草酸、阿魏酸、丁香酸、没食子酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸、儿茶素、表儿茶素、槲皮苷、槲皮素、异槲皮苷、金丝桃苷、芦丁、异鼠李素、原儿茶醛、丁香醛、香草酸己糖苷及其异构体、原花青素A及其异构体、原花青素B及其异构体、原花青素C及其异构体、原花青素D、儿茶素及其衍生物、9-羟基-10,12-十八碳二烯酸和9-羟基-10,12,15-十八碳三烯酸。定量分析结果显示,在Fr-Et OAc中,17种酚类物质的含量总和最高,其次是Fr-Bu OH、二氯甲烷组分(Fr-CH2Cl2)、水组分(Fr-H2O)和石油醚组分(Fr-PE),结果与测定的总酚类化合物含量一致。同时,Fr-Et OAc中定量检出的16种物质的含量均高于其他组分。Fr-Et OAc中酚类化合物含量最高的是香草酸、儿茶素和表儿茶素。采用体外抗氧化实验和抗肿瘤实验来评价砂仁各组分的生物活性。在体外抗氧化实验中,砂仁的Fr-Et OAc和Fr-Bu OH表现出较高的抗氧化活性,它们对DPPH和ABTS自由基的IC50与抗坏血酸无显著性差异,表明其能力与抗坏血酸相当;同时实验表明砂仁各组分的多酚具有一定的抗肿瘤活性,Fr-Et OAc的能力最强,在浓度为1000μg/m L时,对He La细胞的抑制率达到79.04%。采用在碱性条件下,提取砂仁多糖,其砂仁多糖的提取得率为3.97%,糖醛酸含量达到65.66%,总糖的含量为37.10%。经过Sevag法脱除蛋白后,蛋白质的含量只有4.36%。经过液相分析,砂仁多糖的主要单糖成分阿拉伯糖、木糖、半乳糖和半乳糖醛酸。采用UV、SEM、XRD、FTIR和TGA对砂仁多糖的理化性质及结构进行表征,发现砂仁多糖是一种非晶型结构、具有吡喃环、热稳定较好的片状酸性杂多糖。通过对砂仁多糖的体外抗氧化研究表明,砂仁多糖清除DPPH和ABTS自由基的能力的IC50分别为0.81 mg/m L和0.65 mg/m L。采用单因素试验,以感官评价为指标,确定了砂仁风味压片糖果的配方及制作工艺,配方为15%的D-甘露糖醇,7.5%的微晶纤维素,3%的砂仁粉,52.5%的山梨糖醇,10%的麦芽糊精,10%的羧甲基纤维素钠,1%的柠檬酸和1%的硬脂酸镁。根据该配方压制的压片糖果的风味佳,外观斑点均匀,且其质量评价指标中片重差异小于5%,脆碎度小于1%,崩解时限和硬度的测定均符合中国药典的规定。
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