【摘 要】
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目的:为了能从广西产圆斑蝰蛇毒中简单快速地分离纯化神经生长因子(一种治疗各种神经性损伤和神经退行疾病的药物，简称NGF)并观察可溶性Aβ嗡作用下SH-SY5Y细胞活力的改变及提纯的蛇毒NGF对此改变的影响。从而探讨蛇毒NGF在治疗阿尔茨海默病(Alzheimer Disease．AD)等神经神经退行性疾病方面的应用前景。方法:1.采用CM52阳离子交换和Sephadex G-75二步柱色谱联用工艺
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目的:为了能从广西产圆斑蝰蛇毒中简单快速地分离纯化神经生长因子(一种治疗各种神经性损伤和神经退行疾病的药物，简称NGF)并观察可溶性Aβ<,25-35>嗡作用下SH-SY5Y细胞活力的改变及提纯的蛇毒NGF对此改变的影响。从而探讨蛇毒NGF在治疗阿尔茨海默病(Alzheimer Disease．AD)等神经神经退行性疾病方面的应用前景。
方法:
1.采用CM52阳离子交换和Sephadex G-75二步柱色谱联用工艺可以从蛇毒中快速分离得到NGF。
2.应用各种聚丙烯酰胺凝胶电泳测定NGF的纯度和分子量；用PCI2细胞低血清培养鉴定NGF的生物活性。
3.可溶性Aβ<,25-35>作用于SH-SY5Y细胞作为AD早期病理损害的细胞模型，实验设空白对照组、 Aβ<,25-35>损伤组、蛇毒NGF干预组，分别于培育各时间点(12，24，48，72 h)，用4-甲基偶氮唑蓝(MTT)分析法检测细胞活力，乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞损伤程度。
结果:
1．经各种十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳证明所得到的NGF为单一组分，相对分子质量约为32000
2． PC12细胞低血清培养鉴定所得NGF具有明显的促进神经纤维生长的生物活性
3．各时间点A β<,25-35>损伤组与空白对照组相比，SH-SY5Y细胞代谢活力(MTT还原率)明显降低(P<0.01 or P<0.05)，细胞培养液上清中LDH漏出明显增多(P<0.01)，以上损伤在Aβ<,25-35>作用12小时后就已经出现，并随着时间的延长而加重。
4．与损伤组比较，蛇毒NGF提前1h干预组细胞MTT还原率均有显著提高，细胞培养液上清LDH漏出均有显著降低，且有时间依赖性。
结论:
1．超生理量的Aβ<,25-35>可以对神经元细胞造成毒性损害
2．提纯的蛇毒NGF具有时间依赖性的抗Aβ<25-35>损伤和神经细胞保护作用。
3．蛇毒NGF在治疗阿尔茨海默病(AD)等神经神经退行性疾病方面显示出良好的应用潜力。
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