降钙素原（Procalcitonin,PCT）是人降钙素（Calcitonin,CT）的前体物质，由116个氨基酸组成，相对分子量13KD。PCT是甲状腺滤泡旁C细胞产生和分泌，并由细胞内特殊蛋白酶分解为有活性的降钙素。正常人血清中PCT含量很低（＜0.1ng/ml），但在感染细菌或败血症，脓毒症等情况时会急聚上升，同白细胞、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）这些炎症因子相比，其灵敏度及特异性等更高，因此血清PCT水平可以作为鉴定细菌感染程度和抗生素指导使用的临床指标。本文成功构建了pET28-PCT原核表达载体，实现了重组质粒在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达，SDS-PAGE结果显示为可溶表达，分子量大小与预期结果（¹7KD）一致。重组表达后的蛋白经Ni-NTA螯合亲和层析纯化，经Western Blotting显示纯化后的蛋白带有组氨酸标签，纯度达到94.5%，利用PCT抗体的间接ELISA法检测显示原核表达的蛋白具有较高活性。将重组表达PCT作为免疫源免疫Balb/c小鼠，经3次免疫后，采用间接ELISA检测效价，三次免疫后小鼠的效价达到融合条件。取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合制备杂交瘤，用hrPCT-trx蛋白做筛选。经多次有限稀释法得到亚克结果全阳的细胞株五株，分别为F6，G2，C2，D2，E5。将细胞株注入正常小鼠腹腔，制备腹水，腹水效价依次为10⁸，10⁷，10⁷，10⁷，10⁸。腹水经辛酸-硫酸铵法纯化得到单克隆抗体，五株单抗的亚类均为IgG1,纯化后抗体效价依次为10⁷，10⁶，10⁶，10⁶，10⁷，抗体浓度依次为6.26mg/ml，4.347mg/ml，3.95mg/ml,3.864mg/ml，4.439mg/ml。利用毛细管电泳检测纯度依次为89.71%，94.71%，87.96%，97.13%，91.47%，相对分子量依次为173.8KD，164.7KD，175.3KD，172.9KD，172.6KD，亲和常数分别为2.25×10⁹、1.02×10⁸、2.31×10⁷、1.75×10⁸、1.28×10⁸。将得到的五株抗体用于ELISA（辣根过氧化物酶-HRP标记）平台和免疫层析（荧光胶乳标记）平台配对，建立临床快速诊断方法。ELISA平台得到灵敏度、特异性高的抗体对为F6-G2，E5-G2，免疫层析平台得到的最优抗体对为F6-C2。将灵敏度较高的抗体进行临床检测验证。Elisa平台中F6-G2和E5-G2两抗体对临床（n=32）相关系数分别达到0.975和0.985，总体特异性分别为96.15%和96.43%。荧光胶乳标记平台中F6-C2抗体对三批临床样本（n₁=28，n₂=46，n₃=35）检测的相关系数分别达到0.964，0.976，0.955，特异性依次达到97.8%，96%，95.5%。