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喹诺酮类药物和苯二氮卓类药物在畜牧养殖过程中的大量使用或滥用，不可避免地造成在动物性食品中的药物残留。本研究旨在制备苯二氮卓类药物的广谱性单克隆抗体和沙拉沙星的单链抗体，为研究建立免疫分析方法和研制相关检测产品奠定基础。 在实验中，首先对氯硝西泮进行结构改造，将其分子中的-NO2还原为-NH2从而合成半抗原，然后采用戊二醛法将其与牛血清白蛋白偶联制备免疫原。用该免疫原免疫Balb/c小鼠，采用间接竞争ELISA方法测定血清效价及特异性。取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合从而制备杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔，收集腹水并进行纯化得到单克隆抗体。经间接竞争ELISA法测定，该单克隆抗体能识别五种苯二氮卓类药物（氯硝西泮、硝西泮、氟硝西泮、地西泮、奥沙西泮），交叉反应率为24～100％，检测限为0.2～1.5ng/mL。将五种药物分别添加至空白猪组织中（肌肉、肝脏、肾脏），经提取、ELISA检测，添加回收率为74.5～96.5％，变异系数低于15.4％。 另一方面，从分泌抗沙拉沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA，反转录得到cDNA，再通过聚合酶链式反应扩增得到单链抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段。然后将VH和VL进行拼接，得到单链抗体基因(ScFv)。经测序鉴定后，将ScFv基因插入到表达载体pMALTM-C5X中得到重组表达载体，将其转化入Rosetta-gami(DE3)菌株中，表达ScFv抗体。结果表明，该ScFv抗体是以可溶性表达的形式存在。经过纯化后得到的抗沙拉沙星ScFv抗体对沙拉沙星的识别能力与母源单克隆抗体相似。 本研究制备的苯二氮卓类药物广谱单克隆抗体和沙拉沙星单链抗体可以用于动物性食品中两类兽药的残留检测，对保障动物源性食品安全有重要意义。