新疆双峰驼源金黄色葡萄球菌噬菌体的分离及生物学特性研究

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双峰驼是常见的反刍动物,目前针对双峰驼疾病的报道很少,临床上金黄色葡萄球病是新疆地区常见的一种细菌性传染病。目前主要治疗方法是抗生素疗法,抗生素的不规范使用导致多重耐药问题日益严重,治疗效果较差。国内外通过寻找噬菌体疗法来替代抗生素进行治疗。本研究通过调查新疆双峰驼源葡萄球菌分布情况,从264份样品中分离出50株葡萄球菌,分离率为18.94%,其中有8株金黄色葡萄球菌,分离率为3.03%。从新疆双峰驼源中分离纯化出了4株裂解性金黄色葡萄球菌噬菌体(噬菌体FH1、FH2、FH3和FH4),透射电镜图片显示四株噬菌体属于有尾病毒目,长尾噬菌体科。噬菌体FH1和FH2的效价为108PFU/m L,噬菌体FH3和FH4的效价为1011 PFU/m L。噬菌体FH1和FH4的MOI值为1,噬菌体FH2和FH3的MOI值为0.1。一步生长曲线测定出4株金黄色葡萄球菌噬菌体中FH4爆发期最长,为100 min,爆发量最大,为8 108 PFU/m L,说明噬菌体FH4的裂解活性比其它3株强。四株噬菌体在45~60℃之间时均有活性,在65℃时失活。四株噬菌体在p H为12时仍具有较高活性,说明这四株噬菌体有较强的耐碱性,通过效价检测出4株噬菌体稳定性良好。四株噬菌体中FH3和FH4对临床分离到的金黄色葡萄球菌具有较广的裂解范围。以上特性均为后续试验研究噬菌体制剂提供了基础数据。通过结晶紫染色法检测出5株临床金黄色葡萄球菌生物被膜的形成是一个动态过程。利用分离的4株金黄色葡萄球菌噬菌体清除临床金黄色葡萄球菌生物被膜时,噬菌体FH4所用时间最短,在8 h时清除率高于90.00%,即相对其它3株噬菌体来说能在较短的时间内达到较好的清除作用,所以噬菌体FH4清除生物被膜的能力强于其它三株噬菌体。通过上述相关研究对4株金黄色葡萄球菌噬菌体有初步的了解,认为噬菌体FH4可以被用作一种有效的抑制金黄色葡萄球菌的抑菌剂。这为后续将噬菌体制成抗菌制剂并应用于临床预防和治疗,提供了基础数据。
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