[研究背景]胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumors GISTs)占胃肠道间叶源性肿瘤的80%,是最常见的胃肠道间叶源性肿瘤。其预后受肿瘤发生部位,肿瘤直径及核分裂像影响,仅按照肿瘤直径将≤2cm的GIST称为“小间质瘤”,>2cm称为“临床显著型间质瘤或大间质瘤”,二者均起源于胃肠道起搏细胞ICC(interstitial of Cajal),受kit/PDGFRA(70%~85%)基因突变驱动,但大、小间质瘤的临床表现、组织病理学形态、生物学行为和预后明显不同。因此究其根本,遗传学上的差异需要进一步深入研究。有文献报道KIT基因双突变模型小鼠较单突变小鼠中位生存期延长、肿瘤生长减缓,提示双突变可能阻滞肿瘤生长,但KIT基因双突变阻滞生长的机制不明。[目的]研究胃大、小间质瘤KIT基因表达差异,探讨胃小间质瘤惰性生长行为的机制,以便获得大间质瘤的靶向治疗的位点;探讨KIT基因双突变导致胃肠间质瘤停滞生长的机制及对PI3K信号通路mRNA和蛋白表达影响。[方法]1.建立入组标准,收集胃大、小间质瘤标本,HE染色和免疫组化染色观察形态学差异及临床病理学特点,行KIT基因突变高通量测序,分析二者间KIT基因突变的异同点。2.构建KIT V560D单突变、T670I单突变和V560D/T670I双突变模板,转染至工具细胞株293T,观察KIT基因双突变对细胞增殖等生物学行为的影响,以及对PI3K mRNA和蛋白表达影响。[结果]1.胃大、小GISTs与性别、解剖学部位、细胞学亚型间未见明显相关性。2.胃GISTs多见于≥50岁的患者。3.胃小GISTs多合并消化道癌。4.GISTs主要是KIT基因突变后形成的间叶源性肿瘤,多见exon 11的“550-580”热点区突变。5.具有生长潜能的胃小GISTs和生长旺盛的胃大GISTs存在ATM和APC等其他基因联合突变。6.二代测序检测出的1例双突变KIT exon 11 W557G/exon 17 N822Y,分组为生长潜能小GISTs,提示该双突变位点效应可能具有促生长作用。8.293T细胞KIT V560D/T670I双突变组在培养72h后生长逐渐缓慢,最终低于单突变V560D组。9.KIT V560D/T670I双突变组的c-kit、PI3K、AKT、pAKT、pY568+570和pY721蛋白表达水平均低于V560D单突变组。10.KIT V560D/T670I双突变组的KIT、PI3K和AKT的mRNA表达水平均低于V560D单突变组。[结论]1.胃GISTs多见于≥50岁患者,男性略多于女性,组织学亚型以梭型细胞亚型多见。2.高通量基因检测表明KIT基因突变仍是胃GISTs发生发展的主要驱动基因。3.生长潜能的胃小GISTs和生长旺盛的胃大GISTs明显与KIT突变相关。4.KIT基因双突变细胞株增殖水平低于单突变细胞株可能与KIT双突变后KIT及PI3K信号通路基因和蛋白表达水平降低有关。