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宫颈癌在全球妇女新发病例中占第二位,也是妇女癌症死因的第三位。2012年,宫颈癌全球年发病量为527,600例,每年的死亡人数为265,700例,57%新发宫颈癌病例出现在发展中国家。在发展中国家中,宫颈癌新发病例数为444,500例,宫颈癌死亡人数为230,200例。由于广泛使用筛查,美国宫颈癌发病率日益减少；针对人乳头瘤病毒(Human papilloma virus, HPV)的免疫(使用疫苗)将防止HPV的持续感染,因此有望预防妇女患上特定的HPV癌症。尽管美国妇女的宫颈癌患病率正在降低。然而,发展中国家许多妇女无条件接受筛查,宫颈癌发病率还在不断增加(约占全球年发病人数的84.2%),宫颈癌仍是全球妇女的主要健康问题。研究发现,HPV感染与宫颈癌的发生发展关系密切,尤其是高危型HPV(HPV 16、HPV18等)感染,但是HPV感染不是唯一独立致病因素。从HPV感染、宫颈上皮内瘤样病变(Cervical Intraepithelial Neoplasia, CIN)到宫颈癌(Invasive Carcinoma of Cervix, ICC)这种金字塔式的分布,表明宫颈癌发生发展过程中,还可能存在其他因素影响宫颈癌发生发展。众多研究表明,基因突变是恶性肿瘤发生发展浸润转移的根本原因,宫颈癌也被称为是癌基因的激活和失活的抑癌基因参与的多阶段和多步发展进程。因此,寻找分子靶向有效目标治疗宫颈癌仍然是重中之重。Cripto-1基因是EGF-CFC家族成员之一。研究表明Cripto-1与肿瘤有很高相关性,在正常的细胞中表达水平很低或不表达,而在癌细胞株和癌组织中有比较高水平表达。鉴于Cripto-1在肿瘤的恶变及转移过程中的重要作用,被认为是原癌基因。PTEN又名MMAC1,发现于1997年,是第10号染色体同源丢失磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homology deletion on chromosome ten),是迄今发现的第一个具有双特异性磷酸酶活性的基因。PTEN目前发现主要在抑制肿瘤细胞的发生发展、侵袭及转移中发挥作用,通过参与调控细胞内信号转导通路,参与各种生理及病理过程。目的通过免疫组化及Western blot方法检测Cripto-1、p-AKT及PTEN在正常宫颈组织(normal cervical epithelium, NCE)、宫颈上皮内瘤变组织(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)、宫颈浸润癌组织(invasive carcinoma of cervix, ICC)等不同宫颈病变组织中表达情况,分析是否有统计学意义,并研究其相关性。结合临床病理特征,分析因子表达关系,并为临床诊断及治疗提供理论依据。方法1.采用免疫组化方法检测35例ICC患者、30例CIN患者及30例NCE患者宫颈组织中Cripto-1、p-AKT及PTEN的表达差异,并进行相关性分析,结合患者临床病理参数进行分析。2.采用Western blot检测35例ICC、30例CIN和30例NCE中Cripto-1、p-AKT及PTEN的表达差异。3.实验数据计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,计数资料用率表示,Cripto-1、p-AKT及PTEN与临床病理特征之间采用x2检验。Cripto-1、PTEN与AKT的相关性采用Spearman的相关性分析,P<0.05差异有统计学意义。结果1.免疫组化结果显示Cripto-1,p-AKT蛋白阳性表达率在35例ICC组织中(60.0%、80.0%),较30例CIN组织中(42.9%,40.0%)和30例NCE组织中(3.3%,10.0%)明显增高(P<0.05)。PTEN在30例NCE组织中阳性表达率90.0%(27/30)高于30例CIN组织60.0%(18/30)及35例ICC组织28.6%(10/35),且P<0.05。2. Westernblot结果检测显示Cripto-1,p-AKT蛋白在35例ICC组织(0.83±0.21,0.67±0.23)中平均表达水平分别明显高于CIN组织(0.33±0.06,0.33±0.13)和NCE组织(0.08±0.03,0.11±0.05),P<0.05,其在CIN组织中表达也较NCE组织高(P<0.05).PTEN蛋白在NCE组织中平均表达水平分别明显高于CIN组织和ICC组织(0.10±0.05 vs.0.31±0.13 vs.0.81±0.26,P<0.05),其在CIN中表达也分别较ICC高(P<0.05)。3.免疫组化结果进行相关性分析发现,Cripto-1与p-AKT蛋白呈正相关,Cripto-1蛋白与PTEN蛋白呈负相关,PTEN蛋白与p-AKT蛋白呈负相关。Cripto-1在宫颈癌中的表达与年龄、分化程度、临床分期无关(P>0.05),与有无淋巴结转移有关(P<0.05);PTEN、p-AKT蛋白在宫颈癌中的表达与患者年龄、分化程度、临床分期及淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论1. Cripto-1, p-AKT蛋白随着宫颈病变级别增高,蛋白表达水平上调,PTEN蛋白表达水平下降,且Cripto-1与p-AKT表达存在正相关,PTEN蛋白与Cripto-1蛋白及p-AKT蛋白分别呈负相关,提示Cripto-1及PTEN可能分别通过癌基因、抑癌基因角色发挥作用。2.在宫颈鳞癌Ib-IIa中,Cripto-1蛋白表达与是否存在淋巴结转移相关,提示Cripto-1可能在宫颈鳞癌的浸润转移中发挥重要作用。3.检测Cripto-1,p-AKT与PTEN蛋白表达可作为评价宫颈鳞癌Ib-IIa预后的一项辅助指标。