鸡大肠杆菌病一直是家禽规模化养殖中最常见的传染病之一,其造成的死亡和生长抑制给养殖行业带来了巨大的经济损失。临床上大都使用抗生素来治疗和预防,但近年来抗生素的滥用导致细菌的耐药性问题逐渐严重,疗效不佳同时还有严重的药物残留问题,不仅无法有效控制鸡大肠杆菌病,还带来巨大的食品安全问题。因此急需找到能够代替抗生素的药物,很多研究者将目光投向了中草药。传统的中草药处方受限于当时对大肠杆菌病的辨证与认知,在实际应用中疗效并不够令人满意,本试验旨在筛选出以博落回生物碱为主药的防治鸡大肠杆菌病处方,并对其体外抗菌机理进行探究,为相关药物的研发提供实验及理论基础。试验一以博落回生物碱为主药的处方筛选试验。一共进行了三次试验,前两次试验对攻毒方式、给药方式和药物配制比例进行了调整。第三次试验,将176只14日龄蛋鸡公雏随机分成1 1组,分别是博黄Ⅰ组、博黄Ⅱ组、博姜高剂量组、博姜低剂量组、博黄姜1号高剂量组、博黄姜1号低剂量组、博黄姜2号高剂量组、博黄姜2号低剂量组、金霉素预混剂组、阳性对照组、阴性对照组。除阴性对照组外,每只胸肌注射7.5×108cfu/mL大肠杆菌菌液0.5 mL/只,攻毒12h后药物治疗组灌喂给予相应的药物,每日两次连用5天,停药后观察7天,剖解统计疗效。结果显示博姜高剂量组、博黄姜1号高剂量组、博黄姜2号高剂量组对鸡大肠杆菌病有极显著的治疗效果（P<0.01）,并且疗效显著好于金霉素预混剂（P<0.05）;其中博姜黄2号高剂量组在给药期间具有显著的促生长作用（P<0.05）。经过三次试验,确定了博落回生物碱与姜黄粉、黄芩提取物的处方对雏鸡大肠杆菌病具有显著的治疗效果。试验二博姜组方的体外抗菌活性及血根碱抗菌机理的探究。采用管碟法和微量肉汤稀释法检测博落回生物碱和姜黄素对大肠杆菌的抗菌活性,其中血根碱（MIC=31.25μg/mL）抑菌活性最强,白屈菜红碱（MIC=62.5 μ g/mL）次之,其他成分（别隐品碱、原阿片碱、姜黄素）抗菌活性较弱。将血根碱与姜黄素用棋盘法进行联合药敏测试,两者联用无增效作用。对血根碱的抗菌机理进行探究:透射电镜观察发现血根碱处理后大肠杆菌菌体皱缩、表面菌毛被破环;半固体培养基泳动试验结果显示,血根碱作用下大肠杆菌单一泳动和集群泳动都受到了显著抑制（P<0.05）;加入不同浓度血根碱的大肠杆菌培养液中没有检测到大分子物质、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶的增多;通过BCA法检测大肠杆菌培养液中可溶性蛋白浓度,添加了血根碱的菌液中蛋白含量明显减少;通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳观察在血根碱作用下大肠杆菌蛋白质谱带的影响,部分条带亮度变化明显;通过琼脂糖凝胶电泳观察血根碱处理24h后的大肠杆菌基因组DNA的变化,结果显示MBC浓度的血根碱处理后的大肠杆菌基因组DNA由大于2000 bp的单一条带变成100～500bp间的散状条带。结晶紫染色法检测血根碱对大肠杆菌生物被膜的抑制率和清除率,并对血根碱处理下大肠杆菌生物被膜中的多糖含量进行测定,结果显示4～64μg/mL的血根碱对大肠杆菌生物被膜有很好的抑制作用,并能降低生物被膜中的多糖含量。上述试验表明,血根碱通过破坏菌体表面的菌毛和鞭毛降低细菌的运动性和黏附能力,影响大肠杆菌菌体内蛋白质的合成来抑制其分裂增殖,通过对其基因组DNA的切割使细菌死亡,并且能减少生物被膜中多糖的含量、抑制生物被膜的形成。