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[目 的]1.探讨活性维生素D对糖尿病肾病大鼠损伤的保护作用;2.探讨活性维生素D及其受体是否通过PARP1/SIRT1/mTOR信号通路对糖尿病肾病大鼠发挥保护作用。[方 法]将40只SD大鼠随机分为正常对照组10只,DKD模型组30只,其中DKD大鼠模型采用高糖高脂饲料喂养联合小剂量STZ腹腔注射建立,正常对照组以普通饲料喂养。后把DKD模型组分别予维生素D、厄贝沙坦、花生油灌胃分为维生素D组10只,厄贝沙坦组10只,花生油组10只。6周后处死全部大鼠并称取体重,检测空腹血糖(FBG),分离血清检测维生素D(VitD)、维生素D受体(VDR)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血肌酐,收集24小时尿液测尿量并进行尿蛋白定量;HE染色观察肾组织病理学变化;RT-PCR检测各组大鼠肾脏组织中VDR、PARP1、SIRT1、mTOR mRNA的表达水平,Western Blot检测VDR、PARP1、SIRT1、mTOR、p70s6k蛋白及磷酸化的表达水平。多组间采用方差分析,两组间比较采用LSD-t检验法,以P<0.05定为有统计学意义。[结 果](1)各组间体重(g)比较:与正常组(472.19±32.81)相比,维生素D 组(338.41±48.36)、厄贝沙坦组(380.60±52.76)和花生油组(327.59±46.72)体重明显降低(P值均<0.05),DKD模型组组间相比无统计学差异(P值均>0.05);(2)DKD模型组间空腹血糖(mmol/L)比较:维生素D组(16.29±1.81)较厄贝沙坦组(22.09±2.66)和花生油组(21.03±0.61)空腹血糖明显下降(P<0.05);(3)各组间维生素D(nmol/L)含量比较:与正常组(613.32±113.74)相比,厄贝沙坦组(501.33±115.38)、花生油(489.85±46.85)组维生素D降低(P<0.05),但维生素D组(625.40±107.44)与正常组无明显统计学差异;(4)各组间维生素D受体(pg/ml)含量比较:维生素D组(249.45±41.73)较花生油组(159.47±27.53)明显升高(P<0.05),厄贝沙坦组(245.68±36.67)及正常组(210.85±34.18)与维生素D组相比无明显统计学差异(P>0.05):(5)各组间血肌酐(umol/L)比较:维生素D组(93.19±9.02)较花生油组(141.55±24.19)相比明显升高(P<0.05),厄贝沙坦组(102.93±11.91)与维生素D组无明显统计学差异(P>0.05);(6)各组间TC(mmol/L)比较:维生素D组(2.28±0.44)较花生油组(3.53±1.13)相比明显降低(P<0.05),厄贝沙坦组(2.16±0.52)与维生素D组无明显统计学差异(P>0.05);(7)各组间24小时尿蛋白(mg/L):维生素D组(59.544±21.966)、厄贝沙坦组(51.267±19.348)和花生油组(65.895±32.220)较正常组(9.750±3.845)相比均明显升高(P<0.05),与花生油组相比,维生素D组及厄贝沙坦组降低(P<0.05),但厄贝沙坦组与维生素D组无明显统计学差异(P>0.05);(8)各组间TG(mmol/L)、LDL-c(mmol/L)、HDL-c(mmol/L)无统计学差异;(9)HE染色:肾脏病理改变采用HE染色方法。结果可见正常组大鼠肾小球形态规则、完整,无系膜区增生;维生素D组肾小球稍肥大,系膜区未见明显增宽;厄贝沙坦组肾小球肥大,系膜基质增多,系膜区增宽程度;花生油组肾小球体积缩小,系膜区较厄贝沙坦组增宽明显,DKD模型组间比较,维生素D组病理变化较轻。(10)各组间VDR及SIRT1 mRNA表达:与维生素D组(0.79±0.05,0.25±0.04)相比,厄贝沙坦组(0.59±0.08,0.12±0.02)和花生油组(0.25±0.04,0.03±0.01)VDR 及SIRT1 mRNA表达均明显降低(P<0.05),花生油组含量最低(P<0.05);(11)各组间 PARP1 及 mTOR mRNA 表达:与维生素 D 组(1.70±0.33,4.15±0.77)相比花生油组(4.62±0.54,22.38±4.31)PARP1及mTOR mRNA表达明显升高(P<0.05),而厄贝沙坦组(2.18±0.37,6.70±0.63)与维生素D组无明显统计学差异;(12)各组间VDR及SIRT1蛋白表达:与维生素D组(1.019±0.083,0.844±0.035)相比,厄贝沙坦组(0.853±0.058,0.729±0.054)和花生油组(0.726±0.056,0.623±0.032)VDR及 SIRT1 蛋白表达均降低(P<0.05);(13)各组间PARP1蛋白的表达:与维生素D组(0.766±0.036)相比,厄贝沙坦组(0.888±0.090)和花生油组(1.087±0.061)PARP1蛋白表达明显升高(P<0.05),其中花生油组显著升高(P<0.05);(14)各组间mTOR蛋白的表达:与维生素D组(1.019±0.031)相比,厄贝沙坦组(1.150±0.044)和花生油组(1.315±0.033)mTOR蛋白表达明显升高(P<0.05),其中花生油组最高(P<0.05);(15)各组间p70s6k蛋白的表达:与正常组(0.247±0.095)相比,维生素D组(0.442 ±0.293),厄贝沙坦组(0.405±0.126)、花生油组(0.936±0.290)p70s6k蛋白的表达明显升高(P<0.05),但DKD模型组间无明显统计学差异(P>0.05)。[结 论]1、维生素D可以改善糖尿病肾病大鼠的空腹血糖、血肌酐、24h尿蛋白的水平。2、维生素D与VDR结合后可能通过PARP1/SIRT1/mTOR信号通路发挥肾脏保护作用。