口服给药是最重要的常用给药途径,由于目前大部分药物的生物利用度低以及药物的耐药性的产生,导致药物的吸收受到限制。中药的吸收、分布、代谢和排泄的研究是中药现代化的一个基本问题之一,尤其是中药复方药动学研究是中药现代化必须解决的重大难题。因此研究中药中有效成分在胃肠道转运机制对理解中医药的科学内涵和进行合理处方设计具有重要的意义。Caco-2细胞来源于人结肠癌细胞,在国际上是常用来研究药物跨细胞转运机制的模型细胞。黄连与厚朴在临床上常配伍应用,本文系统地研究了黄连厚朴中主要化学成分在Caco-2细胞模型中的转运,对于研究二者各自主要化学成分的吸收转运机理及相互影响有重要的意义,同时也为复方中药的药动学研究提供可借鉴的经验。本实验首先考察了厚朴酚与和厚朴酚在HBSS中的溶解性与稳定性,其次应用MTT法考察了厚朴酚,和厚朴酚与小檗碱不同药物浓度对Caco-2细胞活性的影响,然后建立了快速、可靠和简便的Caco-2细胞模型,考察了细胞的生长情况并进行了模型的验证。应用Caco-2细胞模型进行模拟小肠吸收研究。考察了时间、药物浓度、抑制剂、温度、pH对厚朴酚,和厚朴酚以及小檗碱的吸收与转运的影响,同时比较了厚朴酚,和厚朴酚以及小檗碱单体联合,母药黄连厚朴提取物联合时相应的化学成分在Caco-2细胞模型中的吸收与转运上的相互影响,考察了不同比例组合的各化学成分及提取物在Caco-2细胞模型中的吸收与转运上的相互影响。采用高效液相色谱法测定各药物的转运量并计算表观渗透系数。结果厚朴酚,和厚朴酚在含有0.1%吐温-80的pH=7.4的HBSS中的溶解性和稳定性较好,在37℃下24h内较稳定,光照对二者的稳定性几乎没有影响。200μmol/L以下的厚朴酚、和厚朴酚以及小檗碱在4h内对Caco-2细胞的活性没有影响。在Caco-2模型中的吸收转运实验,厚朴酚,和厚朴酚与小檗碱的转运量都随时间而增加,厚朴酚,和厚朴酚的双向转运比率为0.5-1。维拉帕米可以显著的提高厚朴酚与和厚朴酚AP→BL的转运量。在4℃的时,厚朴酚与和厚朴酚在AP→BL与BL→AP方向的转运量下降了一倍,厚朴酚与和厚朴酚在偏碱性的HBSS中的转运量稍多,但总的来说没有显著性差异。对小檗碱来说,当浓度为50μmol/L时,BL→AP的转运量是AP→BL的转运量的8倍,维拉帕米可以显著降低其BL→AP的转运量,而BL→AP的转运量下降了8倍多。由于小檗碱在偏酸的HBSS中的溶解性较好而有利于小檗碱的转运,因此对于小檗碱来说在偏酸的HBSS中的转运量偏多。相比厚朴酚与和厚朴酚联合时,当厚朴酚,和厚朴酚与小檗碱联合时厚朴酚与和厚朴酚的PaPP有提高,而当黄连与厚朴提取物联合时,厚朴酚与厚朴酚的PaPP提高更加明显,单独的黄连提取物中的小檗碱的PaPP(AP→BL)是(5.85±0.48)×10-7cm/s,而当黄连与厚朴提取物联合时,小檗碱的PaPP(AP→BL)是(12.34±0.45)×10-7cm/s,说明厚朴提取物可以促进小檗碱的吸收,当单体或者提取物联合时,PaPP(BL→AP)值都下降。从以上结果得知厚朴酚与和厚朴酚的的转运方式主要为被动转运,同时兼有主动转运,在AP侧受到P-gp的外排作用。小檗碱在AP→BL方向的转运方式主要为被动转运,而在BL→AP方向的转运方式以P-gp介导的主动转运为主,同时转运受到维拉帕米的抑制,单一的单体与提取物中相对应的单体的转运有非常明显的差异。当三者联合时,尤其是药材提取物联合后在显著提高厚朴酚与和厚朴酚的转运效率的同时可以抑制他们的外排。说明了联合用药更有利于其中的主要成分的吸收并可以避免耐药性的产生,同时也说明了不能以单体的药动学结论来解释和推断复方中相对应的单体的药动学特点。