论文部分内容阅读
人酰基辅酶A：胆固醇酰基转移-1(ACAT-1)mRNA序列来自两条不同的染色体(1q25和7q31.3)，含各自启动子P1和P7。本论文工作着重进行人ACAT-1基因P7启动子活性调控和脂肪酸对人ACAT1基因表达影响的两部分探索。 第一部分的工作首先通过对人ACAT-1基因P7启动子序列进行5’和3’-端的缺失的详细分析，结果显示最大报告基因转录表达活性位于-612～-165bp区段。细胞因子TNF-α即肿瘤坏死因子大量存在于人动脉粥样硬化斑块中，本实验通过荧光素酶活性和RT-PCR测定结果表明，TNF-α处理人血单核细胞和单核细胞株THP-1均增强ACAT-1基因P7启动子活性。 第二部分是初步研究工作，采用BSA助溶脂肪酸并处理转染细胞，瞬时表达荧光素酶活性分析显示，不饱和油酸(oleic acid，C18：1ω 9)和饱和棕榈酸(palmitic acid，C16)对人ACAT-1基因P1启动子活性可能具有不同的影响作用；Western-blot分析表明，三种饱和脂肪酸——棕榈酸(palmitic acid，C16)、硬脂酸(stearic acid，C18)、花生酸(arachidic acid，C20)均可能下调人ACAT-1蛋白表达量。