研究背景:肺癌是目前全球发病率第二位、死亡率第一位的恶性肿瘤,其特点为早期发现难、治愈率低、预后差。阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（Obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS）是一种严重的睡眠呼吸障碍,其主要特点是间歇低氧、片段睡眠导致的一系列心脑肺血管等多脏器损害。近年来,诸多流行病学研究提示OSAHS和各类恶性肿瘤发生密切相关。外泌体是多种活细胞主动向胞外分泌的囊泡小体,内部含有丰富的蛋白质、核酸、脂质,可避免体液中降解酶的影响,保持高度稳定性,参与细胞间信息交流。micro RNAs是一类非编码小RNA（miRNAs）,在转录后水平调节基因表达。目前外泌体及囊泡miRNAs检测正逐渐成为液体活检的重要手段。本课题组前期研究发现OSAHS患者外泌体分泌增加。目前OSAHS致肿瘤发生、发展的机制不明,是否通过外泌体miRNAs作为信号传递通路影响肺恶性肿瘤发生、发展研究较少。研究目的:本研究通过分析肺腺癌合并OSAHS和单纯肺腺癌患者血浆中外泌体miRNAs表达差异,旨在研究间歇缺氧环境下可能影响肺腺癌发生、发展的外泌体miRNAs及其可能参与的调控通路分析。研究方法:（1）所有入组的肺腺癌患者均接受便携式睡眠呼吸监测,分析各组夜间间歇缺氧情况,AHI≥5为肺腺癌合并OSAHS组,AHI<5为单纯肺腺癌组。（2）收集病人外周血,分离外泌体,通过透射电镜鉴定形态、大小,粒径分析粒径范围,流式分析鉴定外泌体表面特异性蛋白的表达。（3）高通量测序获取两组血浆外泌体中差异表达的miRNAs谱,进一步通过RT-q PCR验证。（4）通过靶基因预测、KEGG生物通路分析、GO富集分析,构建miRNAs调控网络分析揭示差异表达的miRNAs在促进肺腺癌发生、发展中的作用。研究结果:（1）两组（病例组和对照组各纳入18例）一般临床资料（性别、身高、年龄、颈围）差异无统计学意义;病例组体重更重,呼吸暂停低通气指数（AHI）、氧减指数（ODI）、身体质量指数（BMI）更高,最低血氧饱和度（LSaO2）更低（p均<0.05）。（2）从入组病人的血浆中分离外泌体;提取的粒子粒径处于20nm-200nm范围所占比例为81.57%,流式细胞分析检测外泌体表面特异性蛋白CD63和CD81均表达阳性信号,表达阳性率分别为16.3%和19.3%。（2）通过测序,共获得78个差异表达外泌体miRNAs（包括44个高表达以及34个低表达的miRNAs）,其中miR-501-3p、miR-500a-3p、miR-107、miR-96-5p差异变化倍数较大且表达丰度较高。（3）q PCR内参稳定性评估显示,miR-4668-5p稳定性优于u6,因此采用miR-4668-5p作为本研究的内参基因。（4）RT-q PCR检测36例肺腺癌患者以上4个miRNAs的表达水平。实验结果表明,外泌体miR-107在肺腺癌合并OSAHS组病人的血浆外泌体中呈高表达,具有统计学差异（p<0.05）,其余候选miRNAs升高趋势与前期测序结果一致,但不具有统计学差异（p>0.05）。（5）KEGG通路分析结果显示两组差异表达的miRNAs参与的相关信号途径可能为HIF-1、PI3K-Akt、Rap1、Ras等癌症\缺氧\炎症相关通路。（6）GO富集分析中,两组差异表达的外泌体miRNAs与囊泡定位形成、细胞核质转运、腺体形成、细胞核转运等功能相关。（7）靶基因分析发现HIF-1A是miR-107的主要靶基因之一。研究结论:1.外泌体miR-107在肺腺癌合并OSAHS中表达明显升高。2.外泌体miR-107可能通过参与调控HIF-1α介导的信号通路参与OSAHS影响肺腺癌的发生、发展。