扁桃体免疫细胞表型与功能的研究

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扁桃体是免疫系统中的一个二级淋巴器官,位于上消化道、呼吸道共同入口处。扁桃体起源内胚层的第二咽囊,是一个进化晚期才出现的器官。胚胎第12周第二咽囊壁被淋巴母细胞浸润,扁桃体开始发育,到出生时扁桃体已具有隐窝、淋巴上皮、初级淋巴滤泡等结构,但直到出生后接触到外界抗原才形成次级淋巴滤泡。扁桃体最具特征性的结构就是隐窝系统及网状淋巴上皮,这是免疫活性区。网状淋巴上皮是一种开放的上皮结构。动态的上皮细胞、特殊的M细胞以及不连续的基底膜,使得抗原可以进入上皮内;同时通过上皮表达的多聚免疫球蛋白受体(PIgR),将合成的SlgA分泌到隐窝中。淋巴上皮内分布着B细胞、T细胞、FDC、浆细胞等各种免疫细胞。网状淋巴上皮下是滤泡区和滤泡旁区,是B细胞对胸腺依赖抗原进行特异性免疫应答的地方。扁桃体的功能状态与年龄有关。 SO军医大qq士学住论文2000.5 4~10岁时功能最活跃,20岁以后开始退化。表现为扁桃体组织内主质细 胞减少、间质细胞增加。慢性炎症可加快退化的过程。扁桃体属于粘膜相 关淋巴组织(MALT),是呼吸道免疫的高效诱导部位,可能还与机体免 疫耐受的形成有关。 虽然实验室研究表明扁桃体具有较高的免疫活性,但切除扁桃体以后 未见局部免疫或全身免疫下降。因而生理条件下扁桃体在机体免疫功能中 所扮演的角色需要进一步的研究。因为表型反应了细胞的功能状态,本研 究对比了胯扁桃体细胞(PTC)与外周血单个核细胞(PBMC)的表型及 其自然杀伤功能,并进一步探讨了M-日对EBV转化的扁桃体B细胞的 趋化作用。主要结果如下。 首先,通过间接免疫荧光染色和流式细胞术分析,对比了PTC与PBMC 表型的差异。发现PTC中CD20ta细胞所占比例为PBMC的4.6倍,且 平均荧光强度高,可能是因为胯扁桃体0T)作为 MALT的诱导区,B 细胞分化较完全。 其次,用’‘Cr 4h释放实验研究了 PT和 PBMC的 NK细胞的活性。发 现未经活化时PTC的自然杀伤活性非常低。大剂量IL-2活化后,在效靶 比为200:l时杀伤率达61.50,是未活化时的12.8倍。而对于PBMC,静 止时效靶比为 100*时杀伤率己达到引%,IL-2刺激后有提高,但幅度不 大。可见PTC储备着一定的免疫能力,一定条件下才释放出来。 然后,以免疫组织化学染色的方法对NK细胞在扁桃体中的分布进行 了定位研究。发现CD56的NK细胞主要位于扁桃体的生发中心,与其它 H级淋巴器官相似,提示B细胞与NK细胞间可能有着的密切关系。 第四,用间接免疫荧光染色流式细胞术分析的方法,研究了两种与NK 细胞杀伤功能有关的新分子血小板 T细胞活化抗原l0TA)和 9.IC3 在扁桃体中的表达。其中PTAI 的表达呈诱导式。原位杂交表明,PTAI 主要分布于扁桃体的滤泡旁区,少量分布在生发中心和内皮细胞上,与本 实验室前期对人的其它淋巴器官和小鼠的研究结果相似。 从以上研究可知,扁桃体既有自己的特征,又有普通二级淋巴器官的 基本结构,因此通过对扁桃体的研究来了解其它淋巴器官的特性。同时由 于扁桃体取材容易、来源广,故常作为研究人淋巴细胞和淋巴器官的好的 摘要5 第四军医大学硕士学位论文 200in 5 材料来源。在本研究的最后一部分,我们系统地观察了INF-口对EBV转 化的 PT的 B淋巴母细胞系(h-LCL)的趋化作用。IN’---Q是一种具有 多种免疫调节功能的细胞因子,同时也是一种促炎因于。TN’--口在外周淋 巴器官的形成中有重要作用,并可直接趋化B细胞。其受体TNFlt-l与淋 巴器官的发育有密切关系。MR-I缺陷的小鼠生发中心(GC)形成障碍。 我们尝试用EBV转化扁桃体B细胞,获得B淋巴母细胞系(TB-LCL)。 在此基础上研究了人重组 TNF-a(ibM.a)对 TB.LCL的趋化性。发 现,rhTN’F川对TB工CL有明显的趋化作用,其趋化作用有剂量依赖关系 和时程特征,并可被抗IN’---日中和活性ab所阻断。可用该模型研究 TNFM R相互作用及其在二级淋巴器官形成中的作用。 本研究表明,扁桃体不仅是一个执行体液免疫功能的器官,而且有一 定的细胞免疫活性,是具有一定免疫潜力的器官。两种与NK细胞杀伤功 能有关的新分子PTAI和9.IC3在扁桃体中有表达。rh1N*---口对h.LCL 有明
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