近年来,基因编辑技术CRISPR/Cas9在动植物中都得到了广泛应用。在本研究中,利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,将与直链淀粉合成有关的颗粒结合型淀粉合成酶基因(Granule-Bound Starch SynthaseⅠ,GBSS I)作为基因组编辑的靶基因,以大西洋、陇薯三号和费乌瑞它作为试验材料,通过基因枪转化将体外合成的核糖核蛋白RNP和mRNA传递到外植体中,实现对靶基因的敲除,以获得无外源DNA插入的马铃薯新品系。本研究以RNP为转化试剂共获得168株再生植株,其中有13株再生植株在靶位点处成功实现基因编辑,而以mRNA为转化试剂的结果还未送测序。本实验得到以下结论:1)以陇薯三号茎段作为外植体分化的愈伤组织,结构过于紧密,用基因枪轰击的方式,未能将反应试剂传递到愈伤组织中;2)以费乌瑞它的茎段作为外植体分化形成的愈伤组织,由于结构松散,导致后期不能分化成苗;3)以大西洋叶片和叶片愈伤组织作为基因枪实验的外植体,最终获得GBSS I基因敲除的转化株,基因编辑效率为0.039-0.36%。本研究说明基于CRISPR/Cas9的基因枪技术通过转化RNP的方法可对马铃薯进行无外源DNA插入且无转基因过程的基因编辑。