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目的： 金黄色葡萄球菌，尤其是耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA），可以引起许多严重的感染性疾病，包括皮肤和软组织的感染（SSTIs）、化脓性关节炎、异物感染、重症肺炎、心内膜炎、脓毒血症、菌血症和败血症等。此外，住院病人鼻腔中定植的MRSA常引起严重的侵袭性感染，且MRSA的携带者可作为院内感染的中间宿主。莫匹罗星常用于治疗由金黄色葡萄球菌或链球菌感染引起的脓疱病，在临床上主要用于医护人员和医院住院患者鼻腔或者其他部位定植的金黄色葡萄球菌的去定值，以降低患者在住院期间由金黄色葡萄球菌引起的血液感染、导管相关性感染、透析相关性感染及手术部位伤口感染的风险。但是，随着莫匹罗星在临床的广泛使用，出现了对莫匹罗星耐药的金黄色葡萄球菌，尤其是高水平耐药菌株的出现给临床预防和治疗金黄色葡萄球菌的感染带来极大的困扰。因此，调查金黄色葡萄球菌对莫匹罗星的耐药情况及开展相关耐药机制和分子特征的研究对临床来说意义重大。 方法： 收集温州一所三级甲等医院2013年9月—2016年3月间连续分离的金黄色葡萄球菌，共1333株，采用琼脂稀释法筛选莫匹罗星耐药株，再用微量标准肉汤稀释法对筛选出来的耐药菌株进行MIC值的检测，并通过Vitek-2全自动微生物分析仪测定耐莫匹罗星金黄色葡萄球菌对临床常用的抗菌药物的敏感性。用PCR方法检测26株耐莫匹罗星菌株的耐药基因mupA和mupB。同时用PCR方法检测PVL、lukE、icaF、sasX毒力基因和qacA/B耐药基因。所有高水平耐药菌株经S1-PFGE电泳后，再将S1-PFGE跑好的凝胶转到尼龙膜上，并以地高辛标记的mupA基因为探针进行Southern blotting来判断耐药质粒大小和位置。分子分型采用金黄色葡萄球菌国际通用的多位点基因序列分型(Multilocus sequence types，MLST)以及葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal surface Protein A typing，spa)序列分析方法进行耐药株的基因分型；采用多重PCR检测所有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株的SCCmec分型；用脉冲场凝胶电泳（Pulsed Fied Gel Electrophoresis，PFGE）对所有耐药菌株进行同源性分析。 结果： 1.金黄色葡萄球菌对莫匹罗星的耐药情况：在1333株金黄色葡萄球菌中，共检出26株耐莫匹罗星菌株，耐药率为1.95%（26/1333），其中MIC值最小为32μg/mL，最大为≥512μg/mL。低水平和高水平耐药百分比分别为0.6%(8/1333)和1.35%(18/1333)。 2.mupA、mupB的检测：18株高水平耐药菌株中除一株外，其余17株均携带有mupA基因；8株低水平耐药菌株中均未检测到mupA基因，未检到mupB阳性的高水平耐药菌株。 3.PVL、lukE、icaF、sasX毒力基因和qacA/B耐药基因检测：26株莫匹罗星耐药菌株中未检测到PVL和sasX，6株莫匹罗星高水平耐药菌株icaF和lukE两个毒力基因同时阳性；1株高水平耐药株qacA/B、icaF和lukE三个基因同时阳性。 4.耐莫匹罗星金黄色葡萄球菌基因分型结果： 4.1．MLST分型：26株莫匹罗星耐药株中发现14种ST型，其中以ST965最常见，占23.08%(6/26)，其次是ST5(15.38%，4/26)和ST7(15.38%，4/26)。MLST结果经eBURST软件分析后，结果分为7个群(group)：group1、group3、group4、group6、group7、group8和groupl3；11种克隆复合体(CC)：CC1、CC5、CC6、CC7、CC45、CC59、CC88、CC121、CC239、CC398和CC573。 4.2．葡萄球菌A蛋白（spa）分型：共检到18种spa分型，无主导型别。 4.3．SCCmec基因分型：26株金黄色葡萄球菌中，13株为MRSA；SCCmec分型结果为：6株为SCCmecⅡ、3株为SCCmecⅢ、3株为SCCmecⅣa和1株为SCCmecⅣa。 4.4．在低水平耐药菌株中流行的MRSA菌株是ST-965-MRSA-Ⅲ，高水平耐药菌株中最流行的MRSA菌株是ST5-MRSA-Ⅱ。 5.PFGE分型结果：所有菌株经脉冲场凝胶电泳分析后分为15型，即（A-0）。A型有7株，其中5株为低水平耐药，ST分型为ST9654株ST51株；B型、D型和J型各有2株；H型3株，均为ST5-MRSA-II；其余各型各只有1株。 6.S1-PFGE和Southern blot结果分析：所有高水平耐药菌株经S1-PFGE后再Southern blotting，结果显示高水平耐药基因mupA的杂交部位在45-65kb左右大小的质粒上。 结论： 1．温州该所三级甲等医院金黄色葡萄球菌对莫匹罗星的耐药率相对较低。 2．金黄色葡萄球菌对莫匹罗星的高水平耐药由携带mupA基因的大小为45kb-65kb左右的质粒所导致。 3．莫匹罗星耐药金黄色葡萄球菌的分子特征呈现多样性，没有发现优势克隆，莫匹罗星的耐药可能不是由于克隆株播散所导致，可能是耐药质粒在不同的菌株之间播散所导致。最新出现的高水平耐药菌株的分子型别应引起临床的关注，如ST5-MRSA-II-t311、ST764-MRSA-II-t002和ST45-MRSA-VIa-t116。