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目的：通过观察艾灸对脾虚大鼠的症状、小肠消化吸收功能、肠上皮细胞膜蛋白物质转运能力及线粒体结构和功能的影响,探讨艾灸健脾作用及其与脾虚大鼠肠上皮能量代谢各环节的相关性,阐明艾灸健脾的分子生物学机制,为艾灸温补脾胃理论提供实验依据。方法：本研究分为三个部分。第一部分：40只健康SD大鼠随机分为4组,即A空白对照组,B脾虚模型组,C艾灸穴位组(脾虚+艾条温和灸组),D中药对照组(脾虚+四君子汤组),每组10只。以大黄水浸剂灌胃建立大鼠脾虚模型,记录造模前后食量、体重、拉尾抵抗时间及脾虚症状总积分,直尺测量小肠推进率,间苯三酚法测定血清D-木糖含量。第二部分：动物分组及处理方法同第一部分。取大鼠空肠上皮细胞,比色法测定空肠上皮细胞三磷酸腺苷(ATP)含量及Na+—K+—ATP酶(Na+—K+—ATPase)和Ca2+—Mg2+—ATP酶(Ca2+—Mg2+—ATPase)活性,免疫组织化学方法测定空肠上皮细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的表达。第三部分：动物分组及处理方法同第一部分。电镜观察大鼠空肠上皮细胞线粒体超微结构,酶联免疫法(ELISA)测定空肠上皮琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CC0或COX)含量,免疫印记(Western—Blot)方法测定空肠上皮细胞内细胞色素氧化酶亚基I (COX I)蛋白表达。1、大黄水浸剂灌胃14天后,与A组比较,B组脾虚模型大鼠体重增长速度减慢,食量下降,拉尾抵抗时间减少(P<0.01),脾虚症状积分显著增加(P<0.01),造模成功。C组艾灸穴位组和D组中药对照组大鼠脾虚症状不明显,食量增长率、体重增长率及拉尾抵抗时间差均显著优于B组(P<0.01),脾虚症状积分显著低于B组(P<0.01),与A组比较无显著差异,D组略优于C组,两组比较无显著性差异。2、B组大鼠小肠推进率和血清D-木糖含量较A组显著降低(P<0.05或P<0.01)；C组和D组大鼠小肠推进率及血清D-木糖含量显著高于B组(P<0.05或P<0.01),与A组比较无显著差异。C组血清D-木糖含量略高于D组,D组小肠推进率略优于C组,C、D两组比较无显著性差异。3、B组大鼠空肠上皮组织ATP含量、Na+-K+-ATPase和Ca2+—Mg2+—ATPa s e活性,及GLUT—1表达较A组显著降低(P<0.05)；C组大鼠空肠上皮细胞ATP含量、Na+—K+—ATPase和Ca2+—Mg2+—ATPase活性显著高于B组(P<0.05或P<0.01)。D组略优于C组,两组比较无显著性差异。C组大鼠空肠上皮细胞GLUT-1表达显著高于B组(P<0.01),而D组与B组比较无显著性差异4、B组空肠上皮细胞线粒体超微结构严重破坏,空肠上皮细胞SDH和CCO含量及COX I表达较A组显著降低(P<0.05或P<0.01)；C、D两组空肠上皮细胞线粒体超微结构轻微损伤,空肠上皮细胞SDH和CCO含量显著高于B组(P<0.05或P<0.01),C组略高于D组,C、D两组比较无显著性差异。C组和D组大鼠空肠上皮细胞COX I表达量显著高于B组(P<0.01),D组略高于C组,C、D两组比较无显著性差异。1、艾灸能显著降低大鼠脾虚症状积分,促进脾虚大鼠体重、食量及体力恢复,提示艾灸具有健脾效应,可改善大鼠脾虚证。2、艾灸能显著增加脾虚大鼠小肠推进率及血清D-木糖含量,提示艾灸可通过改善脾虚模型大鼠小肠运动及消化吸收功能,促进脾虚症状恢复3、艾灸能显著增加脾虚大鼠小肠上皮细胞ATP含量、ATP酶活性及GLUT-1表达,提示艾灸可促进脾虚模型大鼠小肠上皮细胞ATP的生成,增加细胞膜蛋白的含量,改善物质跨膜转运。4、艾灸能促进脾虚大鼠小肠上皮细胞线粒体结构恢复,增加呼吸链酶含量及其亚基蛋白的表达,提示艾灸可通过促进线粒体结构和功能的恢复,改善能量代谢。5、鉴于“脾主运化”功能与线粒体和能量代谢存在相关性,艾灸温补脾胃的效应可能与其修复线粒体结构,改善线粒体氧化酶活性,增强细胞能量代谢,从而加强小肠上皮细胞物质转运能力,促进小肠运动及吸收功能恢复有关。6、艾灸与四君子汤均有健脾作用,能够改善脾虚证,但对能量代谢各环节的调节作用略有差异。四君子汤在促进脾虚大鼠食量、体重及体力恢复,改善小肠运动功能,增加小肠上皮细胞ATPase活性及线粒体COX I蛋白表达等方面优于艾灸；而艾灸在降低大鼠脾虚症状总积分,改善小肠吸收功能,促进小肠上皮细胞ATP生成,增加膜蛋白GLUT-1含量,及提高线粒体酶活性等方面优于四君子汤。