胶原蛋白作为生物体内的重要蛋白质之一,主要存在于动物的骨骼和皮肤中,在结缔组织中是重要的结构蛋白质,起着物质基础的作用,能够支撑并保护器官,是人体及其他动物的生命支架。胶原蛋白只有降解成小分子的多肽和氨基酸时,才能被人体吸收,但其独特的三股超螺旋结构,很难被破坏,因此食用的大部分胶原蛋白很难被人体直接有效的吸收。将胶原蛋白经酶分解成胶原多肽后,则很容易被人体吸收,在消化吸收等特性等方面都会得到显著的提高,并且具有保护胃粘膜、抗溃疡、抑制血压上升,促进骨形成、皮肤胶原代谢等营养及生理功能,对关节炎等胶原病具有很好的预防和治疗效果。目前水解胶原蛋白最有效的方法是利用胶原蛋白酶进行水解。胶原蛋白酶(Collgaenolytci protease)定义为在适当的pH和温度下,只切割活性胶原螺旋区或明胶而不作用于其他蛋白质底物的酶类。目前,已从许多动物组织和微生物中获得胶原蛋白酶。本研究对本实验室提供的胶原蛋白酶产生菌的培养基组分及发酵条件进行优化。将该产生菌以明胶作为诱导物,经液体发酵培养大量增殖。采用Folin-酚法测定酶活力。结果表明其发酵上清液中的酶活达到50.68U/mL。通过离心、硫酸铵沉淀、透析、Sephadex G-75凝胶层析几个步骤对胶原酶进行分离纯化,酶活力达到了19.87U/mg,纯化倍数为8.8,得率为0.38%。经SDS-PAGE电泳检测得到的单一条带,进行标准曲线测得其分子量为54kDa左右。并对该菌株所产的胶原酶进行酶学性质的研究,表明胶原酶最适反应温度为40℃、最适反应pH为8,Mn2+、Cu2+促进菌体生长；而低浓度的Fe2+促进菌体生长,随着Fe2+浓度的升高,转为抑制菌体生长。Mn2+、Fe2+对蛋白酶酶活性起抑制作用,当Fe2+浓度为5mmol/L时,该酶的相对酶活力仅为5.2%；低浓度的Cu2+促进酶活,当Cu2+浓度达到2mmol/L时,相对酶活力达到149.01%,有明显激活酶活的作用,但是浓度继续升高时转为抑制酶活力。