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大肠埃希氏菌(Escherichia Coli,E.Coli)通常称为大肠杆菌,学术界根据其临床致病性将其分为三类：共生型大肠杆菌,肠内致病性大肠杆菌,肠外致病性大肠杆菌。共生型大肠杆菌与宿主是互利共生的关系,并伴随其终生,经粪便散播到周围环境中,一般不致病；肠内致病性大肠杆菌广泛存在于少数宿主的肠道内和环境中,机体免疫功能正常时一般不会引起肠道外的感染,但免疫力低下时会出现肠道外的感染；肠外致病性大肠杆菌(Extraintestinal Pathogenic Escherichia Coli,ExPEC)可使不同的宿主发生泌尿道感染(UPEC)、脑膜炎(NMEC)、败血症(Septicemia)、肺炎(Pneumonia)、腹膜炎(Pleurisy)及其它肠外软组织感染(Soft Tissue Infections),因此受到医学界普遍关注,ExPEC与其他病菌的混合感染,给养殖业造成了巨大的经济损失。基于以上所述肠外致病性大肠杆菌的危害我们开展了本实验,旨在通过对临床分离的肠外致病性大肠杆菌进行研究,掌握ExPEC的流行病学规律,为该病的诊断与防治打下基础；另外开展了猪源肠外致病性大肠杆菌ΔkpsM-ΔiucB双基因缺失菌株构建及疫苗的研制工作,希望得到有效控制ExPEC的方法。具体方法如下：1.选取病猪肺脏、肝脏、脾脏、脑、气管、关节部位的病料,进行分离培养、PCR鉴定试验,得到50株猪肠外致病性大肠杆菌,并对这些菌进行了毒力基因扩增,遗传群系鉴定、药敏实验。结果表明,所分离出的肠外致病性大肠杆菌均具有2个及以上毒力基因,遗传群系以A、B1群系为主,敏感药物有头孢他啶、头孢噻肟等头孢类药物,但是临床上起作用的药物非常有限,耐药现状严重。2.以本实验室成功构建的猪源肠外致病性大肠杆菌强毒株PCN033单基因缺失菌ΔkpsM为受体菌,缺失肠外致病性大肠杆菌PCN033iucB基因菌株为供体菌进行接合转移,构建不含抗性的猪源肠外致病性大肠杆菌ΔkpsM-ΔiucB的双基因缺失突变株,并对其生物学特性和毒力进行了研究。测定猪源肠外致病性大肠杆菌亲本菌PCN033和ΔkpsM-AiucB双基因缺失菌株在昆明小鼠体内的毒力,计算LD50的值。结果显示,与猪源肠外致病性大肠杆菌亲本菌PCN033比较,双基因缺失株ΔkpsM-ΔiucB的毒力降低了约148倍。这就为临床上研制肠外致病性大肠杆菌新型疫苗奠定了基础。