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背景 卵巢癌是迄今预后最差的妇科恶性肿瘤，上皮性卵巢癌即使是晚期患者也常常局限于腹膜腔，较少发生远处转移，这表明上皮性卵巢癌患者存在腹腔局部抗肿瘤免疫机制的缺陷，从而有助于肿瘤在腹腔内生长播散。但目前对于上皮性卵巢癌腹腔免疫机制缺陷的原因尚不清楚，一个可能的机制是肿瘤局部细胞因子的异常表达。近年研究发现，包括卵巢癌在内，细胞因子可能在肿瘤的发生、发展过程中起着重要的作用。 IL-10是一个强有力抗炎性细胞因子，属于TH2型细胞因子，主要参与细胞介导的免疫反应(TH-1型)。IL-10能干扰杀肿瘤机制，它能抑制巨噬细胞分泌TNF-α和活性氧的中间物，降调肿瘤细胞表面MCH-1的表达，干扰抗原递呈细胞的辅助功能。另一方面，IL-10抑制TH1型细胞IL-2和INF-γ的产生。它也能抑制人类外周血T细胞的增殖及人外周单个核细胞INF-γ和其它一些细胞因子的合成。另外还能阻断巨噬细胞及郎罕氏细胞的抗原提呈及肿瘤细胞的肿瘤相关抗原的提呈，有助于肿瘤细胞免疫逃避。在恶性肿瘤的患者腹水、血清及组织中已检测到大量IL-10特异的mRNA和IL-10蛋白，但迄今为止，对于卵巢癌患者中主要由哪群细浙江大学2004届硕士学位论文胞负责产生IL一10的研究仍限于体外卵巢癌细胞系。而且到目前为止，对于卵巢癌细胞能否产生IL一10以及IL一10与上皮性卵巢癌腹腔免疫缺陷的关系尚不清楚，有对于进一步深入研究。 本研究采用ELLSA法检测了上皮性卵巢癌患者术前血清及腹水、4个卵巢癌细胞株培养上清液中IL一10的含量，并以10例上皮性卵巢良性肿瘤患者血清与10位健康血清女性为对照组。同时对64例上皮性卵巢癌、35例卵巢上皮性交界瘤、32例卵巢上皮性良性肿瘤患者的组织及26例正常卵巢组织进行了IL一10的免疫组化;对3个上皮性卵巢癌细胞株 (SKOV3、Caov3、3ao)进行了IL一10的免疫细胞化学染色;并对上述其中58例卵巢癌、16例良性肿瘤、13例正常卵巢的组织及3个上皮性卵巢癌细胞株蛋白裂解液进行了IL一10western一blot分析，以了解上皮性卵巢癌IL一10的表达，并阐明其与卵巢癌腹腔免疫缺陷的关系。材料和方法 选取64例上皮性卵巢癌、35例卵巢上皮性交界瘤、32例卵巢上皮性良性肿瘤患者的组织、26例正常卵巢组织及4个上皮性卵巢癌细胞株 (SKOV3、Caov3、3ao、OVCAR)为研究对象，使用ELLSA法检测32例上皮性卵巢癌患者术前血清及腹水、4个卵巢癌细胞株培养上清液及10例上皮性卵巢良性肿瘤患者血清与10位健康女性血中IL一10的含量。采用免疫组化方法对64例上皮性卵巢癌、35例卵巢上皮性交界瘤、32例卵巢上皮性良性肿瘤患者及26例正常卵巢组织进行了IL一10的分析:3个上皮性卵巢癌细胞株(SKOV二、Caov3、3ao)进行IL一10的细胞化学染色:并对上述其中58例卵巢癌、16例良性肿瘤、13例正常卵巢的组织及卵巢癌细胞株的蛋白裂解液进行western一bfot分析。用染色强度计算法对免疫组织化学结果进行评分和半定量分析，以及采用Quantity One软件对We stern Blot的结果进行半定量分析。 采用单因素方差(One一Way ANoVA)、Man一Whitney秩和检验、符号浙江大学20()4届硕l学位论文秩和检验(、，ilcoxon法和Kruskal一WalliS法)及成组样本的t检验方法进行统计学分析，显著性水准a二0.05，所有的数据用SPSS Io.ofo:windows软件包进行处理。结果1.卵巢癌患者血清、腹水、卵巢良性肿瘤及正常对照血清11厂10水平 上皮性卵巢癌患者自身腹水中I!二一10的水平(中位数M=140.43 pg/m}，四分位数Q，协分别为l曰.72pg/ml，209.09pg/ml)远远高于其血浆Il.一l()的水平(中位数1= 9.75 pg/ml，四分位数Q.，嘶分别为7.91 pg/ml，!6.72pg/ml)两者有显著性差异(尸=0.000)。卵巢癌组血清I卜10的水平(中位数M书.75 pg/m}，四分位数Q.，称分别为7.91 pg/ml，16.72 pg/m1)明显高于良性肿瘤组(中位数M=3.40，四分位数Q，Q，分别为1.魂9。g/ml，5.92p;/ml)及正常对照组(中位数M叫.24，四分位数Q.，q分别为2.1()p只/ml，6.3409/ml)，有显著差异(户0.()00和产0.00:3)。而良性肿瘤组与正常对照组血清比一10水平无显著差异(户0.529)。2.卵巢癌患者腹水比一10水平与其临床分期及组织学分级关系 卵巢癌I:I(i()l!期与川一IV期患者腹水I卜10水平有显著差异(/左0.()()2)，川~I/期患者腹水II.一10水平(中位数M=193.05pg/ml，四分位数Q一，认分别为129.;犯pg八n!，216.06 pg/ml)高于H期患者(中位数M=llo.14p从/ml，四分位数Q.，Q:分别为IOZ.16pg/ml，119.7()pg/ml)。而卵巢癌腹水日厂10水平与组织学分级无关(户0.992)，三组之间无显著差异。3.卵巢癌患者血清日J一10水平与其临床分期及组织学分级关系 卵巢癌I:I〔;OH期与川一IV期患者血清IL一10水平无显著差异(烤0.48);卵巢癌血清IL一10水平与组织学分级也无显著差异(乃0.965)。结果表明上皮性卵巢癌患者血清IL一10水平与其肿瘤的分期及分级无关浙江大学2004届硕士学位论文4.卵巢癌细胞株 卵巢癌细?