【摘 要】
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免疫层析技术由于其快速、便捷、经济等优点,越来越广泛地被应用于医疗诊断、食品分析、环境监测等领域。随着应用研究的深入开展,对免疫层析技术的检测灵敏度、定量分析性能
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免疫层析技术由于其快速、便捷、经济等优点,越来越广泛地被应用于医疗诊断、食品分析、环境监测等领域。随着应用研究的深入开展,对免疫层析技术的检测灵敏度、定量分析性能以及便捷性都提出了更高的要求。开发高质量的标记材料是提高免疫层析试纸检测性能的关键。针对目前标记材料普遍存在的信号强度有限、稳定性差、功能单一等局限性,开发在光学信号放大及功能集成方面有突出优势的纳米复合标记材料具有重要意义。金纳米颗粒和量子点是两类物理化学性能优异的光学纳米材料。以金纳米颗粒和量子点为纳米基元所构筑的复合型纳米光学标记材料,有望解决传统免疫层析技术中存在的灵敏度低、定量分析性能差、信号单一等缺陷和不足。本论文合成了两种基于油溶性纳米基元的可控负载型纳米光学标记材料,并开展了相关免疫层析应用研究。主要工作如下:(1)合成了基于油溶性金纳米颗粒高效负载结构的纳米光学标记材料。利用金属-配基亲和作用以及树状介孔二氧化硅纳米球的三维孔道结构,实现了金纳米颗粒的高密度负载从而有效放大检测信号,同时保持了良好的等离子吸收特性。通过进一步硅烷化修饰、有机硅烷水解缩合、St?ber生长过程提高标记材料的水溶性和稳定性。对该材料的形貌结构、光学性质及胶体性质进行了表征。将该标记材料偶联抗体后应用于免疫层析试纸中,通过竞争法快速、高灵敏检测尿液样本中的甲基苯丙胺。检测结果表明,该方法检测灵敏度比其他方法有较大提高。同时探讨了检测时间、定量分析性能、特异性以及重现性等指标。(2)制备了多层级可控负载型比色/荧光双功能纳米标记材料。选取了合适波段范围的油溶性金纳米颗粒和量子点作为构筑基元,通过树状介孔二氧化硅纳米球和致密二氧化硅中间层构建多层级结构,利用金属-配基亲和作用实现两种纳米基元分别在不同层级载体上的可控负载,有效集成并放大了两种光学信号。经烷基硅烷试剂改性及二氧化硅层的可控生长后得到双信号纳米标记材料。对该材料的形貌结构、水分散性、胶体稳定性以及光学性能进行了表征。将该标记材料偶联抗体后应用于免疫层析试纸中,并通过双抗夹心法检测血清中的胱抑素C含量,实现了双信号可视化检测及高灵敏定量分析。并对该方法的检测时间、特异性、重现性以及实际样品检测等进行了探讨。
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