【摘 要】
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诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)是重编程已经分化了的体细胞,使其表现出类似于胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESCs)样的多能干细胞状态,这项革命性
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诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)是重编程已经分化了的体细胞,使其表现出类似于胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESCs)样的多能干细胞状态,这项革命性技术使山中伸弥获得2012年诺贝尔医学或生理学奖。爱德华综合征,是第二常见的常染色体综合征,染色体异常是由于患者18号染色体有三条。爱德华综合征主要症状是多种器官组织畸形,包括心脏和肾脏异常,特征性的颅面特征,握紧的拳头与压倒性手指,小指甲,不发达的拇指和胸骨短,患者可能需要肠内营养。婴儿死亡率较高,存活的患者都有严重的生长发育迟缓,死亡的主要原因包括中枢性呼吸暂停,心脏畸形引起的心脏衰竭,呼吸道疾病。我们选择了从医院收集皮肤(泌尿科收集包皮)和羊水(产前诊断常规穿刺)来源人的体细胞,进行了成纤维细胞和羊水细胞的原代分离培养。非整合质粒载体比逆转录病毒等更加安全的导入重编程因子,通过瞬时电转的方式,把重编程因子导入体细胞。iPSCs经过纯化后,使用一系列的鉴定方法鉴定其多能性,包括碱性磷酸酶酶染色、rt-PCR检测、拟胚体形成、流式细胞术检测,核型检测确保遗传安全性。在探索iPSCs生成过程中,我们建立了爱德华综合征征iPSCs模型,有助于实验室的罕见病研究工作。我们进行了爱德华综合征iPSCs和正常核型iPSCs的转录组测序比较,筛选得到了在爱德华综合征畸形的组织器官中一些相关基因。
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