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第一部分目的:探讨KIF2C基因对原发性肝细胞癌患者预后的影响方法:首先我们通过从高通量表达数据库Gene Expression Omnibus(GEO)中根据入组标准(1)原发性肝细胞癌,(2)拥有完整的生存资料,(3)拥有完整的基因表达量数据。筛选得到GSE14520数据集,该数据集更新至2017年4月5日,并于2017年12月15日通过验证。下载数据并从中获得原发性肝细胞癌的基因表达数据集,从中筛选得到KIF2C的基因表达量,进行数据处理,将一般临床资料进行单因素分析,并将有统计学差异的指标(P<0.05)纳入多因素分析。同时使用Kaplan-Meier方法绘制生存分析曲线图,探讨KIF2C的表达量与乙肝相关性原发性肝细胞癌患者的预后关系。而后我们通过The Cancer Genome Atlas(TCGA)数据库搜索原发性肝细胞癌患者的临床信息和基因表达谱,下载数据并根据相同的入组标准筛选得到370例原发性肝癌患者的资料与基因表达谱,进行单因素并将有统计学差异的指标(P<0.05)纳入多因素分析。同时使用Kaplan-Meier方法绘制生存分析曲线图。结果:GEO数据的多因素分析结果显示KIF2C表达量与患者预后相关(P=0.009,HR(95%CI)=1.816(1.159-2.844)),Kaplan-Meier生存分析显示KIF2C高表达患者的预后较差(P=0.0119)。TCGA数据的多因素分析结果显示KIF2C表达量与患者预后相关(P=0.001,HR(95%CI)=1.949(1.324-2.869)),Kaplan-Meier生存分析显示KIF2C高表达患者的预后较差(P<0.0001)。结论:KIF2C表达量的高低对于原发性肝细胞癌患者的预后具有一定的影响,高表达的患者预后较差。可能为原发性肝细胞癌的靶向治疗提供新的思路。第二部分目的:通过体外细胞功能实验探讨KIF2C基因对肝癌细胞株SMMC—7721的生物学行为影响。方法:我们通过实时荧光定量PCR检测KIF2C在各肝癌细胞株中的表达量,挑选合适的细胞株进行后续研究。再通过慢病毒介导技术转染SMMC-7721细胞株,构建KIF2C基因沉默、过表达稳定转染细胞株,并通过蛋白印迹技术检测SSMC-7721细胞株中KIF2C基因沉默及过表达效率。进行KIF2C稳定转染细胞株的体外功能试验,包括细胞增殖实验,迁移实验,细胞平板克隆形成,侵袭实验实验等,观察KIF2C基因对SMMC-7721肝癌细胞株生物学行为的影响。结果:细胞增殖实验中,细胞在重新接种并培养至24小时(P=0.004)、48小时(P<0.001)、72小时(P<0.001),四组细胞数目的组间有统计学差异,SMMC-7721、SMMC-7721-kif2c-过表达细胞数目均显著高于SMMC-7721-kif2c-沉默细胞(P=0.011,P=0.035)。细胞平板克隆形成实验中SMMC-7721-kif2c-过表达细胞的克隆形成率明显高于SMMC-7721、SMMC-7721-NC和SMMC-7721-kif2c-沉默细胞。细胞划痕实验中SMMC-7721-kif2c-过表达细胞在0-24h内和24-48h时间段内的平均迁移距离均显著高于SMMC-7721-kif2c-沉默细胞(P=0.044,P=0.016)。细胞侵袭实验中SMMC-7721-kif2c-过表达细胞穿越基质膜的细胞数显著高于SMMC-7721、SMMC-7721-NC和SMMC-7721-kif2c-沉默细胞(P=0.022,P=0.002,P<0.001)。结论:KIF2C基因能够促进肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,迁移侵袭,克隆成形能力。