【摘 要】
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目的:探讨Semaphorin3A对低氧导致人肾小球内皮细胞转分化的影响。方法:第一部分:人肾小球内皮细胞(HGECs)分成常氧组(21%O2)、低氧1组(1%O2)、低氧2组(5%O2)。低氧刺激不同时间后倒置相差显微镜下观察各组细胞形态学变化,ELISA法检测各组细胞上清液中Semaphorin3A的表达,免疫印迹法(WB)检测各组细胞中α-SMA、CD31和VE-cadherin蛋白含量表达
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目的:探讨Semaphorin3A对低氧导致人肾小球内皮细胞转分化的影响。方法:第一部分:人肾小球内皮细胞(HGECs)分成常氧组(21%O2)、低氧1组(1%O2)、低氧2组(5%O2)。低氧刺激不同时间后倒置相差显微镜下观察各组细胞形态学变化,ELISA法检测各组细胞上清液中Semaphorin3A的表达,免疫印迹法(WB)检测各组细胞中α-SMA、CD31和VE-cadherin蛋白含量表达。第二部分:人肾小球内皮细胞(HGECs)分成常氧组(21%O2)、低氧组(1%)、低氧干预组(1%O2+外源性Semaphorin3A),低氧刺激5天后免疫印迹法(WB)检测各组细胞中α-SMA和CD31蛋白含量表达。结果:(1)与常氧组相比较,低氧1组和低氧2组中内皮细胞形态均由铺路石样向梭形或多边形类纤维细胞状改变,低氧1组在第5天形态变化最明显;相较于低氧1组,低氧干预组的细胞仅有少数细胞形态发生了变化,多数细胞还是铺路石样外观。(2)在常氧组、低氧1组和低氧2组细胞培养上清液中均有Semaphorin3A表达,与常氧组相比,低氧1组和低氧2组Semaphorin3A含量减少,在第3天Semaphorin3A表达在三组间差异有统计学意义(P<0.05)。(3)细胞培养第3天、第5天时,相较于常氧组,低氧1组和低氧2组α-SMA蛋白表达升高(P<0.05);细胞培养第1天、第5天时,相较于常氧组,低氧1组和低氧2组中CD31、VE-cadherin蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)相较于常氧组,低氧组和低氧干预组CD31蛋白表达明显降低,但低氧干预组较低氧组下降更明显(P<0.05);低氧组细胞中的α-SMA表达明显升高(P<0.05),当予外源性Semaphorin3A干预后,其表达较低氧组降低(P<0.05),但仍高于常氧组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:HGECs细胞可以分泌Semaphorin3A;低氧促进HGECs发生End MT,并可抑制HGECs细胞分泌Semaphorin3A。外源性Semaphorin3A对低氧导致人肾小球内皮细胞转分化有促进作用,低氧抑制细胞Semaphorin3A分泌可能是低氧条件下细胞的保护性反应。
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