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首先研究了利用核磁共振氢谱(Proton Nuclear Magnetic Resonance,1H-NMR)、高效液相色谱-蒸发光散射检测器(High Performance Liquid Chromatography-Evaporative Light Scattering Detector,HPLC-ELSD)对磷脂酰胆碱(Phosphatidylcholine)、溶血磷脂酰胆碱(Lyso-phospholipid)、甘油磷脂酰胆碱(L-α-Glycerophosphorylcholine)进行定量分析检测,建立起有效的定性及定量手段。然后以磷脂酰胆碱纯度35%的富集磷脂为原料,磷脂酶A1(Phospholipase A1)为工具酶,分别在水相体系中制备LPC,在油水乳化体系中制备GPC,在油水乳化体系中制备富含亚麻酸的结构磷脂。具体研究如下:(1)利用核磁共振氢谱测定磷脂酶A1水解大豆磷脂酰胆碱后的样品中磷脂酰胆碱(PC)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、甘油磷脂酰胆碱(GPC)的相对含量。具体操作为用氘代甲醇溶解样品,进行核磁共振氢谱测定。对比标准品的核磁共振氢图谱,分别选取化学位移δ=4.14~4.16、3.76~3.83、4.40~4.50三处的信号峰作为PC、LPC和GPC的特征性质子峰,并根据PC、LPC和GPC质子峰相对面积与他们的相对分子质量计算三者的相对含量。结果表明,PC、LPC、GPC的平均标样添加回收率分别为103.4%、85.6%、104.8%,相对标准偏差(RSD,n=3)分别为2.2%、5.0%、6.2%。仪器精密度测试中,同一个样品中PC、LPC、GPC含量的RSD(n=5)分别为4.2%,3.5%,2.3%。最后利用本方法对磷脂酶A1水解磷脂的两个样品进行检测,结果表明本方法适用于检测样品中PC、LPC、GPC的相对含量。(2)研究利用HPLC-ELSD测定磷脂样品中甘油磷脂酰胆碱(GPC)含量。检测条件为:岛津CBM 20A液相系统,Alltech Silica色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温40℃,甲醇为流动相,流速1.0 m L/min,蒸发光散射检测器漂移管温度65℃,空气流速1.7 L/min。结果显示GPC为最后出峰的强极性组分,其保留时间为4.97分钟,所得GPC标准曲线为Y=2.0483X+7.7744,线性相关系数R2为0.9914。检测限为6.3μg/m L(S/N=3),定量限为13.0μg/m L(S/N=10)。GPC的平均加标回收率为102.5%,RSD是2.2%(n=3)。表明本方法分离效果好,检测结果准确、稳定,适用于酶催化水解磷脂样品中甘油磷脂酰胆碱的定量测定。(3)研究在油包水乳化体系中利用磷脂酶A1水解磷脂制备LPC。首先利用甲醇作为萃取溶剂制备磷脂酰胆碱(PC)含量为37%左右的富集磷脂,然后在水相体系中利用磷脂酶A1水解富集磷脂,制备溶血磷脂酰胆碱(LPC)。分别讨论了料液比、酶添加量、反应时间对LPC得率的影响。结果表明最佳料液比(富集磷脂:水)、酶添加量、反应时间分别为:1:4、66.7 U/m L、2 h,最佳条件下样品酸值为62.2 mg/g。(4)研究了主要在油包水乳化体系中利用磷脂酶A1水解磷脂制备GPC。因为磷脂酶A1是界面酶,所以利用油包水乳化体系显著增大反应体系的界面面积可以提高酶的作用效率,使得高效制备GPC成为可能。研究结果显示最佳水解条件为:油脂添加量为磷脂质量的4倍,水分添加量为磷脂质量的15%,酶添加量为磷脂质量的10%,反应时间2.5 h。最后水解样品中GPC的纯度为27%。(5)利用亚麻籽油和自制富集磷脂为原料,利用磷脂酶A1在无溶剂体系中首先在常压含水环境中催化水解磷脂和亚麻籽油生成亚麻酸和甘油磷脂酰胆碱等,然后在真空无水条件下,磷脂酶A1催化亚麻酸与甘油磷脂酰胆碱合成富含亚麻酸的结构磷脂。分别研究体系水分含量、常压水解时间、酶添加量和原料比例对结果的影响,利用三氟化硼法对制得结构磷脂进行甲酯化,然后利用GC-FID检测亚麻酸含量。结果表明最佳的水分含量、常压水解时间、酶添加量和原料比例分别为:10%、6 h、4%和3:1,结构磷脂的最高亚麻酸含量为27.7%。